词法分析器c++设计报告_质谱知识小课堂| 分析器专辑 | 静电场轨道离子阱

“For many years the domain of high-resolution mass spectrometry belonged to instruments with large magnets, namely magnetic sectors and FT-ICRs.  While these instruments could provide very high mass resolution and accuracy, they were quite large and impractical for many labs due to the size of the magnets.  After the turn of the century, a new contender named the "Orbitrap" rose to prominence.  The Orbitrap utilizes electric fields to achieve high-resolution mass analysis, eliminating the need for large magnets”-------- massspecpro.com             

庞然大物(FT-ICR-左)与小巧玲珑(Orbitrap-右)

离子阱 是一种重要的质谱检测器，因其优秀的离子传输效率与速度受到大家的喜爱。但传统的线性离子阱因为它的设计构型，具有质量准确度不够、线性范围较低、空间电荷效应降低了阱的效能。很长一段时间以来，大家都在探索一款集多种质量分析器的优势为一体的“完美分析器”，而静电场轨道离子阱(Orbitrap)无疑是当前最符合的大家心之所愿的那一款。 在2005年 ASMS 会议上，T公司发布了一款名为Orbitrap的质量分析器。其优异的性能近年来为它赢得无数奖项，同时推动质谱相关众多领域的发展。可以说Orbitrap是“最年轻”的质量分析器，但却是当前蛋白质等大分子分析领域最重要的分析器。Orbitrap可以分解为Orbi和trap两部分进行理解，顾名思义离子在阱中做环绕运动。那么它的设计原理是什么，又有什么优势呢？憋急，作为质量分析器专辑压轴出场的Orbitrap，M君要从它的来历仔细给您捋一捋。

前前世： The Kingdon Trap

在Orbitrap问世之前，已经有四极杆、飞行时间、离子阱等多种质量分析器，但它们仍然难以同时满足高分辨率和高质量准确度。由于通常阱的作用是“困住”离子，随后对他们进行检测。而离子在静电场中无法静止，因此人们最初没有关注静电场作为一个“阱”。Makarov(Orbitrap发明人)想到：既然离子无法在静电场中静止，是否可以让它们在静电场内以稳定的轨道持续运动达到“困住”离子的目标。实际上很早就有人开发出一款名为KingdonTrap的静电场阱，但不是应用在质谱分析领域中。KingdonTrap设计的核心在于用一个圆柱体作为阱的外部电极，内部设置一根与圆柱体共轴的细线电极。在假设电极无限长时，在内部细线电极上施加DC电压，会产生一个如下的电势：

这个假设的“辐射对数”场将使离子围着中间电极做环绕动作。如下面视频所示，一个正离子将在KingdonTrap沿着细线电极做环绕运动，在同轴方向上循环往复的震荡。(温馨提示：技术原因，该视频会有杂音，打开之前请将手机静音)

前世：The KnightTrap

尽管KingdonTrap能持续“困住”离子，使离子可以在阱中稳定运动。但从上述的电势公式可以看出，离子受到的电势与其质量没有关系，所以无法作为质量分析器使用。1981年，Knight发表了一篇文章对KingdonTrap的外部电极的形状进行修改，希望可以使电势的形式如下所示：

这个电势与Kingdon Trap不同的是增加了位于z轴的电势，使离子可以沿着z方向(即外部圆柱体对称的中心轴)谐波运动(harmonicmotion)。离子在z方向上面的运动频率与它的质荷比相关。我们知道质谱是分析物质的质荷比仪器，Knight Trap外部电极的这个特殊设计，可以看到Orbitrap的设计雏形。

但是，它并不完美。简单来说：1、造型不够美丽，2、缺乏离子检测装置，具体说就是简单的外部构型难以分辨物质精准的质荷比;没有考虑离子图像电流方法作为离子信号输出方式，而是选择将离子从阱中排出检测。

尽管如此，Knight Trap设计理念的先进性还是为Orbitrap的发明指明了方向，推动静电场离子阱发展到成为质谱分析器的可能。 今世：The Orbitrap

1999年，一家英国名为“HD Technology”的公司发布了一个专利。该专利对KnightTrap几何构型进行了改进，如下图所示。简单说，对内外电极的几何构型进行了精细化的修改，并且内部电极设计为一个纺锤体的形状，这一特殊构型可以产生更为复杂的电势以对离子质量进行精确的区分，公式如下：

与Knight Trap一样，离子环绕中间电极进行周期性的来回震荡运动。  

其中，离子在z轴的运动频率为：

从上述等式可以看出，离子运动的频率只与每个离子的m/z值有关。在很短的时空窗口内，具有相同m/z值的离子，将会沿着z轴以相同的频率一起来回振荡。(温馨提示：技术原因，该视频会有杂音，打开之前请将手机静音)

除此之外，Makarov的专利还包括了离子检测方法：主要利用图像电流法进行离子检测。离子沿着z轴的周期性运动可在外部电极以图像电流的方式被检测到。2005年Makarov在《Analytical Chemistry》杂志发表文章向外界正式介绍Orbitrap。到这个时间节点，Orbitrap的来历才真正讲完了。

我们讲到它同时具备高分辨率和高准确度、线性范围宽等优点。那么问题来了，它的性能为什么会如此优秀呢？下面，M君将从离子注入和离子检测两方面说一说:

离子注入

离子注入方面，设计者需要解决的重要问题是如何使离子进入Orbitrap后可以尽快形成稳定的振荡轨道。要达到这个目的，一方面要使离子动能与中央电极的电压完美匹配，不会因为动能太低或太高使离子打到内外电极上面从而信号衰减；另一方面要让m/z相同的离子们尽量同一时间进入Orbitrap，形成聚焦的离子簇，从而获得较高的信噪比。

要解决这些“硬核”问题，我们隆重给大家的介绍“好闺蜜” C-trap，它的引入非常好的诠释了灵魂伴侣的重要性。

下图中Orbitrap左边那个弯曲的“阱”就是C-Trap。它由一个弯曲的中央电极和一个靠近Orbitrap的带狭缝的电极组成。当离子进入C-Trap，加入少量氮气使离子冷却，降低离子动能。累积到一定量离子后，C-Trap中的RF电压降低使离子在阱中不稳定，通过施加合适的DC电压，使离子被脉冲到Orbitrap中。

动能降低后的离子们的动能分布范围降低，增加了离子之间动能的一致性；而累积一定时间的离子随后分批脉冲至Orbitrap中进行检测，相同m/z的离子簇聚焦在Orbitrap中的同一时间产生图像电流信号，增强了信噪比。

离子检测

基本原理：某m/z的离子在Orbitrap内来回振荡在外部电极引发电流，随后其他离子外部电极上产生电流。原始的电流(aka"transient”)是指在这一时刻所有正弦波的总和。通过将这种信号进行傅里叶转换，使频率谱转变成合适的质谱图谱，对应于不同的m/z值。

在这一部分我们还要跟大家扯另一个问题：FT-ICR磁质谱为什么可以产生分辨率非常高的图谱？答案是跟离子在磁场中的跑道长度有关，由于离子在跑道中跑道非常长，离子质荷比之间的微小的差异信息被检测器充分检测到。对应到Orbitrap也是类似的原理。在静电场阱中，离子们可以在轨道中“飞”足够久，产生足够强的信号被检测到。

这就解释了为什么Orbitrap可以产生高分辨图谱的基本原因。这里产生了另一个问题，即我们可以采集电流的时间最长为多久？根据这一信息我们可以估测出仪器的最高分辨率。

除此之外，任何对离子轴向运动不利的因素都将影响同一质荷比离子轴向上的谐波运动，导致电流信号衰减或消失。如：

1. Trap电极提供的电势场不理想

2. 施加在中央电极上的DC电压不一致

3. 离子间的空间-电荷效应

4. 离子与背景气体分子之间的碰撞

对上述任何方面的改进将增加离子的分辨率。

高质量准确度

除了具有高分辨率之外，Orbitrap的质量精准度非常高。目前Orbitrap仪器的质量精准度可以达到1~5个ppm级别(ppm: portion per million, 百万分之一)。高分辨率与高精准度使得Orbitrap在大小分子分析领域均占尽风头。

番外

Makarov曾在一次采访中称：Orbitrap项目得以生存并发扬光大，侥幸地因为Orbitrap团队的3个核心成员随着公司从英国搬迁到德国不莱梅。他非常感慨：“所以我们有一个重要的经验教训，在高科技研发领域，人是最重要的，而不是技术本身。” 

M君由衷希望，未来的中国更加关心技术人员的发展，为他们提供更多发挥能力的平台，为国家的技术创新添砖加瓦，创造属于我们国家的高精尖分析仪器！

说明：1.本篇文章主要基于massspecpro网站关于Orbitrap分析器的内容，在翻译原文的基础上进行了修改；2.本文内容仅用于知识传播；3.关于分析器的内容涉及大量的专有名词，如有错误，欢迎指正。

参考阅读：

http://www.massspecpro.com/mass-analyzers/orbitrap

https://www.antpedia.com/news/81/n-346181.html

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