graphpad如何检测方差齐_流式PI染色法检测细胞周期之前中后

流式周期的检测，整个环节包括样本的制备、流式细胞仪的条件设置、后期周期数据的拟合分析以及文章的出图，本文从以上4个方面做一简单介绍

1 样本的制备

1.1 常规乙醇固定PI染色：该方法简单易行，不过需要乙醇固定过夜，时间需要较长，下图则是源于四川大学华西医院移植免疫实验室李兰老师的经验推荐，供大家参考(注：细胞内RNA可以自行添加RNA酶进行去除)，而对于肿瘤细胞或者黏连比较厉害的细胞，在乙醇固定细胞时，西南医院癌症中心的马清华老师则建议可以尝试细胞加入70%乙醇中

1.2 商品化的快速PI染色：借用贝克曼库尔特公司的商品化试剂盒PerFix-nc Buffer 1 和Cell Cycle kit进行，前者进行温柔的细胞破膜，常温仅需15分钟，洗涤细胞后加入Cell Cycle kit中的PI染色液，常温避光15分钟完成周期染色后即可直接上机检测，本方法成本会更高但对操作者细胞处理细节要求更低，也更节约时间。下图为该商品化试剂盒做出的Jurkat细胞系周期图