盖玻片是显微镜制样中常用的耗材,但是盖玻片是有厚度的,它会对光线穿行造成一定的改变,从而影响成像的清晰度和亮度。由于绝大部分的物镜是针对0.17mm(或者称为#1.5)盖玻片进行设计生产的,因此常规制样过程中,显微镜厂商一般推荐使用厚度为0.17mm的盖玻片以达到最佳的成像效果。
但是市面上的盖玻片耗材多种多样,厚薄不一(见表1)。除此之外,在倒置显微镜上,经常会使用诸如培养皿、多孔板等各种不同类型的耗材,有些器皿的底部厚度甚至达到了1-2mm。此时,必须使用带有校正环功能的物镜来进行成像。
表1、MatTek公司不同号码盖玻片及其对应的实际厚度
在倒置显微镜中,经常需要配置长工作距离物镜,因为长工作距离物镜不仅能用于载玻片观察,还能兼容不同底部厚度的器皿,进行活细胞观察。在长工作距离物镜上,我们经常会发现有一圈能左右转动的校正环(图1)。针对不同厚度的耗材,我们需要将校正环调节到不同位置。
图1、带校正环的20倍和63倍物镜。英文简写CORR代表此物镜带