微波辐射对人成神经母细胞瘤SY5Y细胞增殖与分化的影响

（CSCD核心+中文核心、吉林医药学院、吉大）
神经元纤维蛋白（neurofilament protein，NF）是神经元特异蛋白，属于中间纤维蛋白家族成员。在神经细胞中有NF-L、NF-M、Nf-H三种主要神经元纤维蛋白组成的异元多聚体，他们是神经突触最为丰富的细胞骨架成分，其中重链亚基（NF-H）在神经细胞的结构和功能方面有重要作用，并与细胞的增殖与分化有密切联系。可促进肿瘤细胞增殖并可以干扰大脑正常细胞信号转导等功能。细胞分化形态观察：20μmol/LATRA黑暗下诱导分化，48h更换培养液。诱导分化72h后，在光学显微镜下观察分化细胞形态：以分化的轴突长度为细胞体直径2倍的细胞为分化细胞。细胞分化的比例以每孔随机5个区域，每个区域25个细胞，每种处理统计4个细胞培养孔，共计500个细胞，计划出分化细胞比例。
流式细胞仪测细胞周期、蛋白质印迹检测细胞NF-H的表达。
总结：原来考虑重复磁刺激对分化影响时，想的是分化完成后再测。这是错误的，应该在各个时间段皆进行测量。比如RA诱导的第3/6/9天（这个实验用RA诱导了72h，其他文献中有的是10-12d,甚至18d。可能该实验诱导72h并未完全分化，只是分析分化进程的快慢）等。做细胞分化时，除了除growth-associated protein (GAP-43), neuronal nuclei (NeuN), synaptophysin (SYN), synaptic vesicle protein II (SV2), neuron specific enolase (NSE) and microtubule associated protein (MAP)等，对NF-H的检测也是很有意义的。无论检测什么指标，最好是现象与其进一步微观机制都进行检测，使得研究更有深度。