神经科学体外模型:SH-SY5Y细胞分化为具有成熟神经元形态和生化特征的细胞

(2区 林雪平大学 300左右)
摘要:我们的目标是开发一个改进的体外模型,产生具有人类成熟神经元形态和生物化学的可持续细胞。为了获得具有神经分化和功能的细胞,我们研究了细胞外基质(ECM)凝胶中SH-SY5Y细胞的三维培养与报道的几种具有神经分化作用的因素相结合的效果。这导致细胞具有明显的神经元形态与长,广泛分支的神经元突起。进一步的研究揭示了包括突触蛋白Sv2和核标记物NeuN在内的几种神经特异性标志物的表达,以及突触和轴突囊泡转运的存在。此外,这些细胞表达成熟的tau亚型,与未分化的细胞相比,tau蛋白表达显著增加,达到成人大脑的水平。
介绍:神经元特异性蛋白很少在SH-SY5Y细胞中表达和分布,其水平与成熟神经元相当。蛋白质的多样性作为成熟神经元的标记,比如神经元等特定β-III微管蛋白,这是几乎只在完全表达在神经元和分化的标志和减少核扩散特定β-III神经元微管蛋白,是分化与增殖抑制的标志。突触的标记物是突触囊泡蛋白Sv2。突触的标志物是突触囊泡蛋白Sv2,一种存在于神经元和内分泌细胞突触前囊泡中的糖蛋白,参与突触结构和递质释放。此外,神经特异性核标记物NeuN是有丝分裂后神经元的标记物,也是成熟的标记物。
Tau是微管结合蛋白,对微管的稳定性、轴突的发育和转运具有重要意义。Tau蛋白与包括AD在内的几种神经退行性疾病有关。有报道称在未分化的SY5Y发现了该物质,因此不可作为成熟大脑的标志物。Tau在成熟人神经元和培养细胞中的表达和分布是不同的。在成熟的人神经元中,Taught主要存在于周图中,而在培养的细胞中存在于包括细胞体在内的整个细胞中。在研究AD时,越来越多的人关注微管功能和轴突转运。因此,建立一简单可行的细胞模型是非常重要的。
细胞培养:SY5Y、10%胎牛血清,每周换液两次。使用了两批不同的细胞࿰

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