细胞
暮涩
这个作者很懒,什么都没留下…
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迎接SY5Y
近来身体微恙,昨日尤甚。上午给PC12细胞换了溶液,从9.17号养细胞天以来,一直不理想。查阅的材料显示PC12细胞贴壁疏松,我们养的这批细胞大部分贴壁铺开生长。同时复苏的两支细胞,状态不一。一支光滑透亮,很漂亮;另一只细胞边缘粗糙,有黑色颗粒状物体附着在细胞表面。培养基用1640+10%FBS,生长状态极差,越养越少,直到10.26换了血清(查阅北京协和细胞中心:1640+10%+5%FBS)之...原创 2018-11-06 09:48:42 · 473 阅读 · 1 评论 -
GLcells
**GLcells**这是一位不会被人注意到的博主,因为敲出来的不是代码更偏生物,且博主又只是一个从电气跨专业到生物医学工程的硕士小白。他依然愿意在这里敲击键盘,记录小白闪现的灵光和前进和印迹。这一段话,或许第二次看到的时候,只觉得一无是处。但我依然要郑重的敲出来,用以宣示开通博客的仪式感,也是对CSDN这方宝地的尊重。考研政治让我感受到了哲学的力量。近年来科技的突破源于数学的进步,数学的...原创 2018-11-04 22:08:23 · 324 阅读 · 6 评论 -
SH-SY5Y培养
6日收到SY5Y细胞后,将完全培养基吸出保存在4℃环境下,培养瓶内留有5ml供细胞生长。中午观察,SY5Y的密度在80%左右,放至二氧化碳培养箱(37℃,5%二氧化碳)培养。因细胞昨日5号从北京协和细胞中心邮寄出,次日到达天津,运输过程中的环境不利于细胞的生长,因此细胞需要一段是时间自我恢复(几个小时至24H不等)。下午6时左右(收到细胞后大约7小时),细胞状态良好,密度增加。这只细胞很坚挺。昨天...原创 2018-11-08 22:45:36 · 6237 阅读 · 0 评论 -
细胞污染及污染源排查与细胞传代、冻存
17号给SY5Y换液,细胞密度大概在40-50,18号下午观察到SY5Y略显浑浊且有炫富小黑点,未在意。19号上午再次观察发现溶液浑浊显现为浑白色,并伴有热烈酸腐味道。镜下观察绝大多数细胞脱离底壁悬浮收缩,确认细胞被污染且无挽救之可能。首要问题是排查污染源,四瓶细胞悉数覆没,可能与培养液,操作不当、培养箱灭菌等有关。将新鲜培养液放置于培养箱中,24小时后出现低密度小黑点,再次过夜后溶液浑浊不堪,小...原创 2018-11-24 20:32:58 · 1175 阅读 · 0 评论 -
免疫荧光染色一抗多克隆抗体与单克隆抗体的区别
单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别首先*1.制备上的区别经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为balb/c小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免...原创 2019-03-20 11:11:51 · 6784 阅读 · 0 评论 -
新订购的SY5Y与PC12与实验
寒假期间贮存细胞的液氮罐液氮挥发告罄,所有保存的种子全部over。损失惨重,这是一次血的教训,已排查出原因。因此,原计划的实验,日期被拖推迟。2.15返校至今,多在阅读文献,设计实验。2.23在国家细胞资源共享服务平台从北京分部订购了PC12、SY5Y两支细胞,分别于3.15和3.16收货。这是个惊喜,根据细胞中心的回复,应在下旬到货。将细胞中心的完全培养基吸出,留少许供细胞生长使用。前期扩增留种...原创 2019-03-17 20:53:15 · 932 阅读 · 0 评论 -
神经元树突、早期、突触及神经元标志物
1、神经元树突标志物:微管相关蛋白Microtubule-associated protein-2(MAP-2):Neuron Dendrite-specific MAP; protein found specifically in dendritic branching of neuron 是组成神经元细胞骨架的重要组成成分,包括:MAP5、MAP1.2和MAP1三种不同类型。在神经系统发育、形...转载 2019-03-21 21:28:40 · 8179 阅读 · 0 评论 -
强度、密度预实验
4.3接种一批SY5Y,密度分别是4W/孔和8w/孔。不知是由于计数失误还是细胞生长太快,8w/孔预计7号做mtt,但今天已经完全长满愈合,下午做MTT。4w/孔的也已80%左右,预计明天长满,做MTT。下午换液,将T25瓶子的细胞接种。密度分别为4/2/1w每孔。强度分别为30%、15%,15Hz。在15%强度下,设置20/40个序列串。一共十二个板子,刺激起来会比较费劲。磁刺激仪发热严重,阻...原创 2019-04-05 10:52:07 · 168 阅读 · 0 评论 -
近期实验进展
3.30号接种SY5Y,80000cells/孔、40000cells/孔各三板,预实验摸强度。今天刺激后发现细胞状态不佳,多数裂解。自30号接种至3号已经4天多,没换液。丢弃后,按照之前的密度再次接种,明日开始刺激,04.09号可以做MTT。接种后镜下观察,两次结合总虽然密度相同,但后者从视觉上明显觉得密度偏大。昨天练习细胞爬片:在培养皿上放置盖玻片后,滴加调好浓度悬浊液,利用液体张力,使液体...原创 2019-04-03 14:24:57 · 236 阅读 · 0 评论