HPLC工作原理及仪器组成

高效液相色谱法(HPLC)是一种利用高压泵推动溶剂通过色谱柱进行混合物分离的分析技术。混合物各组分在固定相和流动相的作用下分离,通过检测器转换成电信号,最终在HPLC软件中形成色谱图。主要组件包括高压泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录仪、脱气机和柱温箱。

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高效液相色谱法(HPLC)是一种用于分离、鉴定和量化混合物中的各组分的分析技术,利用色谱柱对混合物进行分离,然后用光谱法进行鉴定和定量。在20世纪60年代,采用低压玻璃柱的柱色谱LC进一步发展为采用高压金属柱的高效液相色谱HPLC。因此,高效液相色谱法基本上是一种高度改进的柱液相色谱法。溶剂不是在重力作用下通过色谱柱,而是利用高达400个大气压的输液泵送入色谱柱。

HPLC工作原理

混合物各组分通过与固定相、流动相之间的相互作用,在色谱柱中进行分离纯化;

固定相是存在于色谱柱中一种非常小的多孔颗粒材料,流动相是在高压迫使下通过色谱柱的一种溶剂或混合溶剂。用注射器注入样品,通过一个连接样品回路的阀门,使样品与流动相混合,随后样品中各组分以不同的速率通过色谱柱,由于各组分与固定相之间的吸附能力不同,各组分依次流出色谱柱,通过合适的检测器将组分浓度转换成电信号传递到计算机的HPLC软件上。运行结束后,在HPLC软件中就可以得到色谱图。

HPLC仪器组成

 

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