HPLC分类及其原理

高效液相色谱(HPLC)根据流动相和固定相极性、分离原理、分析目的及洗脱方式可进行多种分类。正相HPLC适用于非极性化合物分析,而反相HPLC因其广泛适用性在药物、食品等领域应用更广。此外,HPLC还包括亲和色谱、离子交换色谱等多种分离技术。分析型HPLC用于定性和定量分析,制备型HPLC则用于分离纯化。等度洗脱和梯度洗脱则根据流动相变化区分。
摘要由CSDN通过智能技术生成

HPLC分类有很多种,可以根据不同的依据进行分类。

  1. 根据流动相和固定相的极性不同,HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。

正相高效液相色谱:色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时,由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力,使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长,因此非极性化合物最先被洗脱出来。许多物质都可以用正相色谱法分析,但由于药物、食物和其他生物制品大都是非极性的,所以在日常生活中应用不如反向色谱法广泛。

反相高效液相色谱:固定相由非极性化合物组成,如十八烷基硅烷、C18、C8等有机化合物。流动相是极性的。因此,极性高的化合物最先被洗脱,低极性或无极性的化合物最后洗脱。

HPLC大都是对药物、食品、生化分子等物质进行分析,而它们在自然界中都是极性物质(水溶性)。因此,反相高效液相色谱应用更为广泛。

 

2.根据分离原理的不同,HPLC可分为以下六种。

亲和色谱:主要利用样品与固定性之间的亲和性,实现分离。

离子交换色谱:基于固定相与流动相的带电基团发生可逆交换,达到分离目的。离子交

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