多肽合成：3X FLAG peptide 402750-12-3

3X FLAG peptide 是带有 FLAG 标签的多肽，包含三个重复的 Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp 基序。3X FLAG peptide 可用于蛋白分离纯化，和目标蛋白竞争性洗脱。

 

中文名称: 多肽标签3X FLAG peptide

英文名: 3X FLAG peptide

CAS号: 402750-12-3

单字母: H2N-MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK-OH

三字母: H2N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-OH

氨基酸个数: 23

分子式: C120H169N31O49S

平均分子量: 2861.87

精确分子量: 2860.14

等电点(PI): 4.88

pH=7.0时的净电荷数: -2.55

平均亲水性: 1.3954545454545

疏水性值: -2.49

消光系数: 4470

 

3X FLAG peptide，作为一种高度特异性和广泛应用的生物标记工具，其设计基于FLAG标签系统，该系统通过融合表达技术将特定的多肽序列附加到目标蛋白质上，以实现蛋白质的识别、纯化及后续分析。这一多肽序列由三个重复的Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp（其中Xaa代表任意氨基酸，但通常这两个位置是Gly或Ser，以增加序列的灵活性和溶解度）基序组成，因此得名“3X FLAG”。

蛋白分离纯化：在蛋白质研究中，将目标蛋白与3X FLAG peptide融合表达后，可以利用商业上可获得的、高度特异性的FLAG抗体或与之结合的亲和树脂（如FLAG M2树脂）来捕获这些融合蛋白。这种方法基于抗原-抗体相互作用或特定分子间的亲和力，能够高效且特异性地从复杂混合物（如细胞裂解液、组织提取物或发酵液中）中分离出目标蛋白。此外，FLAG标签相对较小，对目标蛋白的结构和功能影响较小，使其成为蛋白质纯化的理想选择。

目标蛋白竞争性洗脱：在纯化过程中，一旦目标蛋白被FLAG亲和树脂捕获，可以通过竞争性洗脱的方式将其从树脂上释放。这通常涉及使用高浓度的FLAG肽段（如游离的3X FLAG peptide）作为竞争性配体，它们与树脂上的FLAG抗体或结合位点结合，从而替代并释放出原本结合的目标蛋白。这种方法既保持了目标蛋白的活性，又允许了纯化过程的灵活性和可控性。

应用优势

• 高特异性：FLAG标签与相应抗体或亲和树脂之间的相互作用具有极高的特异性，减少了非特异性结合的干扰。
• 灵活性：FLAG标签大小适中，对目标蛋白的影响较小，且不影响其下游应用，如蛋白质结晶、酶活性测定等。
• 高效性：通过简单的亲和层析步骤即可实现目标蛋白的高效纯化，适合大规模生产。
• 多功能性：FLAG标签不仅可用于纯化，还可作为免疫印迹、免疫沉淀等实验中的检测标签，增强了实验的多样性和灵活性。

综上所述，3X FLAG peptide作为一种强大的生物标记工具，在蛋白质科学研究中发挥着不可替代的作用，极大地促进了蛋白质分离纯化技术的发展。