常用的肝癌细胞系培养、分离方法以及常见问题（整理）

回顾无血清培养基40多年的发展历程，可以大概分为无血清培养基、无动物源培养基、无蛋白培养基及化学成分限定培养基等四类。

类型	描述	应用方向
无血清培养基 Serum-free medium,SFM	不添加动物血清，含替代血清材料，如转铁蛋白、胰岛素和动植物的提取物等	可就实际需求进行成分改进，应用广泛
无动物源培养基animal component free medium,ACFM	蛋白水解物、重组蛋白或其他 化学物质来取代动物源蛋白，	生物 药品的研发和生产中
无蛋白培养基Protein-free medium,PFM	不含有血清和动物来源 的蛋白，但包含来源于植物蛋白的水解物或合成多肽片段等其他衍生物，	生命科学研 究和基因工 程药物开发 等领域
化学成分限定培养基Chenically Defined medium,CDM	完全无血清、无蛋白，成分完全明确，可以保证培养基批次间的一致性	研究跟踪细胞培养的代谢情况、分离纯化细胞代谢产物等

无血清培养基，作为最新的3.0代培养基，由于对细胞培养的普适性不强，通用性不高，以及成本较高等，所以可能还需要走很长的一段路进行改进与完善。但是，作为当前最可靠、最安全、最高效的培养基，我们还是有很多的实验案例来参考的。所以，三三为各位小伙伴们总结了近年来不同方向无血清培养典型的论文案例，小可爱们可以进行参考使用无血清培养基，请喜欢的马住了！

[1]用于研究肿瘤细胞的生长和迁移机理的研究;

论文:

Kajirom,HirotaR,NakajimaY,etal.TheubiquitinligaseCHIPactsasanupstreamregulatorofoncogenic pathways[J].Nature CellBiology,2009,11(3): 312-319.

 

[2]最新研究显示,利用无血清培养基可以从病人原位肿瘤中提取并培养肿瘤干细胞,这类细胞保留了原有肿瘤的基本特征,并能在免疫缺陷小鼠中诱发肿瘤 的发生｡目前,研究人员已成功获得了乳腺癌的肿瘤干细胞细胞系,为进一步研究肿瘤发生发展机制提供了有力的工具和模型｡更为重要的是,无血清培养基去除了血清中的促分化剂,适宜肿瘤干细胞的富集和培养｡

 

论文:PontiD,CostaA,ZaffaroniN,etal.Isolationandin vitropropagation oftumorigenic breastcancercells with stem/progenitor cell properties [J]. Cancer Research,2005,65(13):5506-5511.

 

[3]具体方向:研究人员已成功获得了结肠癌的肿瘤干细胞细胞系｡

论文:Ricci-VitianiL,Lombardi D G,Pilozzi E,etal. Identification and expansion ofhuman colon-cancer- initiatingcells[J].Nature,2007,445(7123):111-115.

 

[4]研究人员已成功获得了神经母细胞瘤的肿瘤干细胞细胞系｡

 

论文:Bate-EyaL T,Ebus M E,KosterJ,etal.Newly- derivedneuroblastoma cell linespropagatedinserum- free media recapitulate the genoty peandpheno type of primary neuroblastomatumours [J].European Journal ofCancer,2014,50(3):628-637.

 

 

[5]Lei等的研究表明,无血清培养可以增加前列腺癌细胞系DU145中肿瘤干细胞标志物CD133和CD44阳性的细胞比例 (从0.1% ±0.01%上升至10.3%),并使得原本无CD133和CD44阳性肿瘤干细胞的PC-3细胞获得了3%的肿瘤干细胞阳性比率;

 

论文:WangL,Huang X,Zheng X,etal.Enrichmentof prostatecancerstem-likecellsfrom human prostate cancercelllinesbycultureinserum-freemedium and chemoradiotherapy [J]. International Journal of Biological Sciences, 2013,9(5):472-479.

 

[6]Bouwer等研究显示,他 们利用无血清培养可以彻底解决 DC肿瘤疫苗治疗 中血清干扰的问题,并且还保持类似血清培养状态下的生物学功能[28]｡这为进一步安全地应用DC肿瘤疫苗治疗肿瘤提供了有效方法和理论依据｡

 

论文:BouwerAL,NetterP,KempR A,etal.Adefined serum-free medium useful for monitoring anti- melanoma responses induced by dendritic cell immunotherapy [J]. Journal of Immunological Methods,2010,352(1/2):178-181.

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