FastQC的安装与使用

高通量测序获取的原始数据是一条条reads,再经过检测和拼接形成完整的基因组序列。这千千万万条序列就相当于我们数据分析实验的材料,如果测序质量比较差,那么得出的结果……,嗯,你懂的。

今天小编分享给大家一个常用的测序数据质控工具FastQC,它可以评估这些序列的质量并给我们出具一份报告,便于我们对测序结果有一个整体的把控,为后续的数据处理提供依据。

接下来我们就一起探索一下如何使用这个软件查看自己测序数据的质量吧~

01 FastQC简介

FastQC是一款基于Java语言设计的软件,目前可以直接下载免费使用,一般在Linux环境下使用命令行执行程序,它可以快速地多线程地对测序数据进行质量控制(Quality Control),还能进行质量可视化来查看质控效果。运行一段时间以后,会出现报告。使用浏览器打开后缀是html的文件,这就是图表化的fastqc报告。

FastQC官网:Babraham Bioinformatics - FastQC A Quality Control tool for High Throughput Sequence Data

​FastQC的下载地址:

Babraham Bioinformatics - Public Projects Download,根据链接下载并按照指示安装。软件信息和使用信息可以查看“README”,安装信息查看“Installation and setup instructions”。

FastQC支持的格式

(1) FastQ (all quality encoding variants)

(2) Casava FastQ files*

(3) Colorspace FastQ

(4) GZip compressed FastQ

(5) SAM

(6) BAM

(7) SAM/BAM Mapped only (normally used for colorspace data)

02 安装与使用

(1)Windows系统

① 首先下载对应的软件包。

② 下载后解压缩,查看文件夹的内容。

③ 双击“run_fastqc.bat”运行程序,页面如下图所示。

④ 点击“Help”>“Contents…”,可以查看FastQC的软件简介、基本操作、分析结果等详细信息。

⑤ 点击“File”>“Open…”>选择要分析的序列文件。

⑥ 通过点击文件夹和文件,选择需要进行分析的数据,点击打开。

⑦ 现在进入了FastQC的分析界面,稍等片刻就可以查看分析结果。

⑧ 保存报告,点击“File”>“Save report…”>选择要存放的位置。

⑨ 查看保存的文件。

(2)Linux系统

FastQC是在Java环境下运行的,所以在安装fastqc之前,Linux下要有相应的Java运行环境(JRE),目前大多数发行版都已经安装了java,所以你可能不需要自己进行安装啦!我们暂时就不介绍如何安装了哦~但是保险起见,我们还是确定一下自己的Linux系统是否安装了java环境。

#查看是否具有Java

两个命令二选一命令:

which java 
java -version

如果显示“not found”,可以根据提示的命令输入后运行进行下载。

Ubuntu系统可以通过执行以下命令安装java。

sudo apt install default-jre

完成java环境配置后,就可以开始学习Linux下FastQC安装与使用了。

基于conda安装

在Linux系统下可以直接使用conda安装:Fastqc :: Anaconda.org

#安装代码

conda install -c bioconda fastqc

#查看fastqc是否安装完成

fastqc --version

#查看fastqc的参数

fastqc --help

主要参数解读:

-o 或 --outdir #FastQC生成的报告文件的储存路径,生成的报告的文件名是根据输入来定的

--extract #生成的报告默认会打包成1个压缩文件,使用这个参数是让程序不打包

-t 或 --threads #选择程序运行的线程数

-q 或 --quiet #安静运行模式,一般不选这个选项的时候,程序会实时报告运行的状况

#使用fastqc进行质量检测,在当前文件夹生成一个.html网页文件和一个.zip文件。

fastqc 样本名称

#批量处理样本,在指定文件夹result生成.html网页文件和.zip文件。

fastqc 样本1 样本2 … -o 文件夹

下载安装包 在网站上选择对应的下载入口:

Babraham Bioinformatics - Public Projects Download, 点击进行下载,获得了一个压缩包fastqc_v0.11.9.zip。

首先进行解压缩,运行命令unzip fastqc_v0.11.9.zip。

解压缩后生成了一个名为FastQC的文件夹,cd FastQC进入文件夹,ls -l可以看到里面有一个fastqc执行文件。

如何运行分析呢?

./fastqc+文件名称,就可以运行fastqc程序啦!

注意:输出文件默认储存在分析文件所在文件夹中(data)。

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转载自原创文章:

FastQC的安装与使用

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### 回答1: 1. 首先,您需要下载FastQC安装文件。您可以从FastQC的官方网站上下载最新版本的安装文件。 2. 下载完成后,您需要解压缩安装文件。您可以使用以下命令来解压缩文件: tar -zxvf fastqc_v.11.9.zip 3. 进入FastQC安装目录,并运行FastQC安装脚本: cd FastQC chmod 755 fastqc ./fastqc 4. 如果您的系统缺少必要的依赖项,您需要先安装这些依赖项。您可以使用以下命令来安装依赖项: sudo apt-get install default-jre 5. 安装完成后,您可以运行FastQC来检查您的数据质量。您可以使用以下命令来运行FastQC: ./fastqc your_data.fastq 6. 运行完成后,FastQC会生成一个HTML报告,您可以在浏览器中打开该报告来查看您的数据质量。 ### 回答2: FastQC是一个广泛使用的质量控制工具,可以对Illumina测序数据进行快速而准确的分析。安装FastQC可以帮助研究人员评估测序数据的质量,提高实验的可靠性和相关分析的准确性。 在Linux中安装FastQC需要遵循以下步骤: 1. 下载FastQC软件包 可以访问FastQC的官网(https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/)下载最新版本的FastQC软件包。将下载的程序包保存到一个你喜欢的位置,例如/home/user/soft/。 2. 解压缩FastQC软件包 使用Linux命令tar –xzvf fastqc_v0.11.8.zip -C /home/user/soft/将FastQC程序压缩包解压缩到刚才选择的目录。 3. 授权FastQC执行权限 使用chmod命令将FastQC程序授权为可执行文件: $ cd /home/user/soft/FastQC/ $ chmod 755 fastqc 4. 设置环境变量 为了能够在任何位置执行FastQC,需要将FastQC添加到PATH环境变量中。可以编辑.bashrc文件并将FastQC的路径添加到PATH变量中: $ cd ~ $ nano .bashrc export PATH=$PATH:/home/user/soft/FastQC 5. 安装Java环境 FastQC需要Java环境支持。如果你的计算机没有安装Java环境需要安装: $ sudo apt-get update $ sudo apt-get install default-jre 6. 测试FastQC 使用FastQC对测试数据进行分析,在Linux命令行中输入以下命令: $ fastqc /home/user/data/test.fastq.gz 如果一切都设置正确,将启动FastQC并生成质量控制报告。报告以HTML格式显示,可以使用任何Web浏览器查看。若要在命令行模式下解压缩FastQC报告,请运行以下命令: $ unzip /home/user/data/test_fastqc.zip 以上是在Linux下安装FastQC的步骤。安装FastQC使用它可以帮助科学家分析Illumina测序数据的质量,提高实验的可靠性和相关分析的准确性。 ### 回答3: FastQC是一款广泛使用的质量控制工具,可以对Illumina平台的测序数据进行质量分析。在Linux系统上安装FastQC需要按照以下步骤进行。 一、安装Java FastQC是基于Java开发的,所以要在Linux系统上运行FastQC,首先需要安装Java。可以使用以下命令安装OpenJDK: sudo apt-get update sudo apt-get install openjdk-8-jdk 安装完成后,可以使用以下命令检查Java是否正确安装: java -version 二、下载FastQCFastQC官方网站(http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/)下载FastQC源代码,或者在终端中使用以下命令下载: wget https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/fastqc_v0.11.9.zip 三、解压缩FastQC 下载完成后,需要解压缩FastQC文件。可以在终端中使用以下命令: unzip fastqc_v0.11.9.zip 四、设置权限并运行FastQC 解压缩完成后,需要为FastQC脚本设置可执行权限。可以在终端中使用以下命令: chmod +x FastQC/fastqc 最后,可以使用以下命令运行FastQC: ./FastQC/fastqc [options] file1 file2 ... 其中,[options]是可选参数,file1,file2...是需要进行质量控制的测序文件。 总之,安装FastQC并不算难,但需要按照步骤进行操作。如果出现问题,可以参考FastQC官方网站提供的教程或者咨询专业人士的帮助。

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