绿色荧光蛋白标记革兰氏阴性
利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签,即利用DNA重GFP标记的微管组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内活体观察。而且GFP的荧光产生不需要水母中特别组分的参与,蛋白质序列本身已经包含了GFP发光所需的信息。Tsien等人表明生色团的形成不需要酶或辅助因子的参与,而只需氧分子的存在。GFP在DNA内至少都有3个启动子。将其与目的基因结合后,对宿主细胞的功能结构基本无影响。当其在细胞内得到表达后,在蓝光的照射下,可以发出荧光,并借助荧光显微镜或者激光共聚焦显微镜即可对活细胞进行实时定位观察,如细胞分裂、染色体复制和分裂,发育和信号转导等。1994年,Chalfie等人在原核的大肠杆菌中表达了具有荧光性的GFP。
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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.10.9
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