组合探针FISH是一种将荧光标记的探针与靶DNA序列进行杂交,并通过荧光信号的检测来识别细胞中特定基因或染色体畸变的技术。该技术采用多色荧光标记探针,可以同时检测多个靶DNA序列,具有高灵敏度、高特异性、高分辨率和高通量等优点。
技术要点:
1.探针设计:组合探针FISH的探针是经过特殊设计的DNA序列,可以与靶DNA序列进行互补结合。探针上附有荧光标记物,以便于信号的检测。探针的设计是关键,需要考虑靶DNA序列的特异性、探针的长度和标记物的选择等因素。
⒉样本准备:样本准备是组合探针FISH技术的关键步骤之一,包括细胞固定、细胞膜裂解、靶DNA变性等过程。样本准备的要求较高,需要保证细胞的完整性和DNA的充分暴露。
3.杂交反应:将探针与变性后的靶DNA进行杂交,形成DNA-DNA双链结构。杂交反应的条件和时间对结果的影响较大,需要严格控制。
4.信号检测:通过荧光显微镜对杂交后的细胞进行观察和拍照,记录不同颜色荧光信号的位置和强度。信号检测的准确性和可靠性是组合探针FISH技术的关键。
相关探针:
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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.11.20