G6P (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又称6-磷酸葡萄糖)是葡萄糖的第6位碳上的羟基在己糖激酶催化下发生磷酸化后生成的分子,是细胞中常见的糖代谢小分子,参与糖酵解(glycolytic pathway)和磷酸戊糖(pentose phosphate pathway)等生化途径。在糖酵解的第一步反应中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸,以继续糖酵解的其它步骤;而在戊糖磷酸途径中,葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物,该过程也是生成NADPH的主要途径。除了这两个代谢途径外,葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被存储起来。
WST-8法(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二硝基苯基)-2H-四唑-3-氧化钠)通常要用于评估细胞活性和细胞代谢活动。
本试剂盒可检测样品中的G6P含量,具体原理如下:葡萄糖-6-磷酸(G6P)在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PDH)的作用下氧化生成6-磷酸葡萄糖酸内酯(6-phosphogluconate, 6-PG),在这一反应中NADP+ 被还原为NADPH,生成的NADPH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium Methyl Sulfate)的作用下将WST-8还生成橙黄色的formazan,在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的formazan与样品中总的G6P的量呈正比关系。
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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.12.8