中文名:马赛替尼
CAS:790299-79-5
品牌:MedChemExpress (MCE)
存储条件:Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.
生物活性:马赛替尼 (AB1010) 是一种有效的、口服生物可利用的、选择性 c-Kit 抑制剂(IC50=200 nM 用于人重组 c-成套工具)。它还抑制 PDGFRα/β (IC50s=540/800 nM)、Lyn ( LynB 的 IC50= 510 nM)、Lck,以及较小程度上的 FGFR3 和 FAK。马赛替尼 (AB1010) 具有抗增殖、促细胞凋亡活性和低毒性[1][2][4]。 IC50 和目标:IC50:200 nM(试剂盒)、540 nM(PDGFRα)、800 nM(PDGFRβ)、510 nM(LynB)[1]
体外:在浓度≤500 nM 时,马赛替尼是一种针对 ATP 的竞争性抑制剂。马赛替尼还有效抑制重组 PDGFR 和细胞内激酶 Lyn,并在较小程度上抑制成纤维细胞生长因子受体 3。相比之下,马赛替尼表现出对 Abl 和 c-Fms 的弱抑制。与伊马替尼相比,马赛替尼更强烈地抑制脱颗粒、细胞因子产生和骨髓肥大细胞迁移。在表达人野生型 Kit 的 Ba/F3 细胞中,马赛替尼抑制 SCF(干细胞因子)诱导的细胞增殖,IC50 为 150 nM,而 IC50抑制 IL-3 刺激的增殖的浓度约为 >10 µM。在表达 PDGFRα 的 Ba/F3 细胞中,马赛替尼抑制 PDGF-BB 刺激的增殖和 PDGFRα 酪氨酸磷酸化,IC50 为 300 nM。马赛替尼还抑制肥大细胞瘤细胞系和 BMMC 中 SCF 刺激的人 Kit 酪氨酸磷酸化。马赛替尼抑制 Kit 功能获得突变体,包括 V559D 突变体和 Δ27 小鼠突变体,在 Ba/F3 细胞中的 IC50 分别为 3 和 5 nM。 Masitinib 抑制包括 HMC-1α155 和 FMA3 在内的肥大细胞瘤细胞系的细胞增殖,IC50 分别为 10 和 30 nM[1]。马赛替尼在两种新型 ISS 细胞系中抑制细胞生长和 PDGFR 磷酸化,这表明马赛替尼对原代和转移性 ISS 细胞系均显示出活性,并可能有助于 ISS 的临床管理[2]。
体内:马赛替尼以 30 mg/kg 抑制肿瘤生长并增加表达 Δ27 的 Ba/F3 肿瘤模型的中位生存时间,无心脏毒性或遗传毒性[1]。
马赛替尼(12.5 mg/kg /d, po) 与安慰剂相比,狗的总体 TTP(肿瘤进展时间)增加[3]。
激酶试验:将 96 孔微量滴定板用 0.25 mg/mL 聚(Glu,Tyr 4:1)包被过夜,用 250 µL 洗涤缓冲液(10 mM 磷酸盐缓冲盐水 [pH 7.4] 和 0.05% Tween 20)冲洗两次并干燥在室温下放置2小时。测定在室温下进行,最终体积为 50 µL,激酶缓冲液(10 mM MgCl2、1 mM MnCl2、1 mM 原钒酸钠、20 mM HEPES,pH 7.8)中含有 ATP,每次浓度至少为 Km 的两倍酶和适量的重组酶以保证线性反应速率。引入酶后开始反应,并通过每 5mol/Lurea 混合物添加一反应体积 (50 μL) 的 100 mM EDTA 来终止反应。将板洗涤三次并与1:30,000辣根过氧化物酶缀合的抗磷酸酪氨酸单克隆抗体一起孵育,然后洗涤三次并与四甲基联苯胺一起孵育。最终反应产物通过 450 nm 分光光度法进行定量。
细胞试验:为了测定 Ba/F3 细胞增殖,在 37°C 下将总共 104 个细胞/孔接种到含有 10% 胎牛血清的 100 μL RPMI 1640 培养基中的微量滴定板中。这些是否补充或不补充来自 X63-IL-3 细胞的 0.1% 条件培养基或 250 ng/mL 鼠 SCF。激活 Kit 的鼠 SCF 是从产生 SCF 的 CHO 细胞的条件培养基中纯化出来的。细胞与马赛替尼一起在 37°C 下生长 48 小时,然后与 10 μL/孔的 WST-1 试剂在 37°C 下孵育 3 小时。使用扫描多孔分光光度计通过 450 nm 处的吸光度来定量形成的甲臜染料的量。没有细胞的空白孔用作分光光度计的背景对照。
动物体内实验:雄性 Nog-SCID 小鼠(7 周龄)在 20±1°C 的特定无病原体条件下,在 12 小时光照/12 小时黑暗周期中,随意获取食物和过滤水。 Mia Paca-2 细胞的培养如上所述。第 0 天 (D0),将溶于 200 µL PBS 的 107 个 Mia Paca-2 细胞注射到小鼠右侧腹部。让肿瘤生长 1.5 至 4 周,直到达到所需的肿瘤大小(约 200 mm3)。在第28天,将动物分配到四个治疗组(每组n=7至8),确保每组的平均体重和肿瘤体积良好匹配。然后进行长达4周的治疗,之后处死动物。治疗包括:a) 对照组每日使用无菌水,b) 每周两次腹膜内 (ip) 注射 50 mg/kg 吉西他滨,c) 每日强饲 100 mg/kg 马赛替尼,或 d) 联合 ip 注射每周两次 50 mg/kg 吉西他滨,每天强饲 100 mg/kg 马赛替尼。用卡尺测量肿瘤大小并使用公式估计肿瘤体积:体积=(长度×宽度2)/2。肿瘤生长抑制率计算为(100)×(治疗组的中位肿瘤体积)/(对照组的中位肿瘤体积)。
参考向:www.medchemexpress.com/Masitinib.html
参考文献:
[1]. Dubreuil P, et al. Masitinib (AB1010), a Potent and Selective Tyrosine Kinase Inhibitor Targeting KIT. PLoS One, 2009, 4(9), e7258.
[2]. Lawrence J, et al. Masitinib demonstrates anti-proliferative and pro-apoptotic activity in primary and metastatic feline injection-site sarcoma cells. Vet Comp Oncol, 2011, doi: 10.1111/j.1476-5829.2011.00291.x.
[3]. Hahn KA, et al. Masitinib is safe and effective for the treatment of canine mast cell tumors. J Vet Intern Med, 2008, 22(6), 1301-1309.
[4]. Marech I, et al. Masitinib (AB1010), from canine tumor model to human clinical development: where we are? Crit Rev Oncol Hematol. 2014 Jul;91(1):98-111.