马赛替尼 (AB1010) 是一种有效的、口服生物可利用的、选择性 c-Kit 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

中文名：马赛替尼

CAS：790299-79-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：马赛替尼 (AB1010) 是一种有效的、口服生物可利用的、选择性 c-Kit 抑制剂（IC50=200 nM 用于人重组 c-成套工具）。它还抑制 PDGFRα/β (IC50s=540/800 nM)、Lyn ( LynB 的 IC50= 510 nM)、Lck，以及较小程度上的 FGFR3 和 FAK。马赛替尼 (AB1010) 具有抗增殖、促细胞凋亡活性和低毒性[1][2][4]。 IC50 和目标：IC50：200 nM（试剂盒）、540 nM（PDGFRα）、800 nM（PDGFRβ）、510 nM（LynB）[1]  

体外：在浓度≤500 nM 时，马赛替尼是一种针对 ATP 的竞争性抑制剂。马赛替尼还有效抑制重组 PDGFR 和细胞内激酶 Lyn，并在较小程度上抑制成纤维细胞生长因子受体 3。相比之下，马赛替尼表现出对 Abl 和 c-Fms 的弱抑制。与伊马替尼相比，马赛替尼更强烈地抑制脱颗粒、细胞因子产生和骨髓肥大细胞迁移。在表达人野生型 Kit 的 Ba/F3 细胞中，马赛替尼抑制 SCF（干细胞因子）诱导的细胞增殖，IC50 为 150 nM，而 IC50抑制 IL-3 刺激的增殖的浓度约为 >10 µM。在表达 PDGFRα 的 Ba/F3 细胞中，马赛替尼抑制 PDGF-BB 刺激的增殖和 PDGFRα 酪氨酸磷酸化，IC50 为 300 nM。马赛替尼还抑制肥大细胞瘤细胞系和 BMMC 中 SCF 刺激的人 Kit 酪氨酸磷酸化。马赛替尼抑制 Kit 功能获得突变体，包括 V559D 突变体和 Δ27 小鼠突变体，在 Ba/F3 细胞中的 IC50 分别为 3 和 5 nM。 Masitinib 抑制包括 HMC-1α155 和 FMA3 在内的肥大细胞瘤细胞系的细胞增殖，IC50 分别为 10 和 30 nM[1]。马赛替尼在两种新型 ISS 细胞系中抑制细胞生长和 PDGFR 磷酸化，这表明马赛替尼对原代和转移性 ISS 细胞系均显示出活性，并可能有助于 ISS 的临床管理[2]。

体内：马赛替尼以 30 mg/kg 抑制肿瘤生长并增加表达 Δ27 的 Ba/F3 肿瘤模型的中位生存时间，无心脏毒性或遗传毒性[1]。
马赛替尼（12.5 mg/kg /d, po) 与安慰剂相比，狗的总体 TTP（肿瘤进展时间）增加[3]。

激酶试验：将 96 孔微量滴定板用 0.25 mg/mL 聚（Glu,Tyr 4:1）包被过夜，用 250 µL 洗涤缓冲液（10 mM 磷酸盐缓冲盐水 [pH 7.4] 和 0.05% Tween 20）冲洗两次并干燥在室温下放置2小时。测定在室温下进行，最终体积为 50 µL，激酶缓冲液（10 mM MgCl2、1 mM MnCl2、1 mM 原钒酸钠、20 mM HEPES，pH 7.8）中含有 ATP，每次浓度至少为 Km 的两倍酶和适量的重组酶以保证线性反应速率。引入酶后开始反应，并通过每 5mol/Lurea 混合物添加一反应体积 (50 μL) 的 100 mM EDTA 来终止反应。将板洗涤三次并与1:30,000辣根过氧化物酶缀合的抗磷酸酪氨酸单克隆抗体一起孵育，然后洗涤三次并与四甲基联苯胺一起孵育。最终反应产物通过 450 nm 分光光度法进行定量。

细胞试验：为了测定 Ba/F3 细胞增殖，在 37°C 下将总共 104 个细胞/孔接种到含有 10% 胎牛血清的 100 μL RPMI 1640 培养基中的微量滴定板中。这些是否补充或不补充来自 X63-IL-3 细胞的 0.1% 条件培养基或 250 ng/mL 鼠 SCF。激活 Kit 的鼠 SCF 是从产生 SCF 的 CHO 细胞的条件培养基中纯化出来的。细胞与马赛替尼一起在 37°C 下生长 48 小时，然后与 10 μL/孔的 WST-1 试剂在 37°C 下孵育 3 小时。使用扫描多孔分光光度计通过 450 nm 处的吸光度来定量形成的甲臜染料的量。没有细胞的空白孔用作分光光度计的背景对照。

动物体内实验:雄性 Nog-SCID 小鼠（7 周龄）在 20±1°C 的特定无病原体条件下，在 12 小时光照/12 小时黑暗周期中，随意获取食物和过滤水。 Mia Paca-2 细胞的培养如上所述。第 0 天 (D0)，将溶于 200 µL PBS 的 107 个 Mia Paca-2 细胞注射到小鼠右侧腹部。让肿瘤生长 1.5 至 4 周，直到达到所需的肿瘤大小（约 200 mm3）。在第28天，将动物分配到四个治疗组（每组n=7至8），确保每组的平均体重和肿瘤体积良好匹配。然后进行长达4周的治疗，之后处死动物。治疗包括：a) 对照组每日使用无菌水，b) 每周两次腹膜内 (ip) 注射 50 mg/kg 吉西他滨，c) 每日强饲 100 mg/kg 马赛替尼，或 d) 联合 ip 注射每周两次 50 mg/kg 吉西他滨，每天强饲 100 mg/kg 马赛替尼。用卡尺测量肿瘤大小并使用公式估计肿瘤体积：体积=（长度×宽度2）/2。肿瘤生长抑制率计算为(100)×(治疗组的中位肿瘤体积)/(对照组的中位肿瘤体积)。

 参考向：www.medchemexpress.com/Masitinib.html

参考文献：

[1]. Dubreuil P, et al. Masitinib (AB1010), a Potent and Selective Tyrosine Kinase Inhibitor Targeting KIT. PLoS One, 2009, 4(9), e7258.

[2]. Lawrence J, et al. Masitinib demonstrates anti-proliferative and pro-apoptotic activity in primary and metastatic feline injection-site sarcoma cells. Vet Comp Oncol, 2011, doi: 10.1111/j.1476-5829.2011.00291.x.

[3]. Hahn KA, et al. Masitinib is safe and effective for the treatment of canine mast cell tumors. J Vet Intern Med, 2008, 22(6), 1301-1309.

[4]. Marech I, et al. Masitinib (AB1010), from canine tumor model to human clinical development: where we are? Crit Rev Oncol Hematol. 2014 Jul;91(1):98-111.