HEK293 HUVEC MRC-5三种正常细胞

本文详细介绍了HEK293、MRC-5及HUVEC细胞的培养、传代、冻存方法,包括生长特性、培养基配制、操作步骤等关键信息。

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HEK293细胞-人体肾脏上皮细胞

来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA

 

传代 吸去培养液。 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。 2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。 6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。 加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1214为宜,传代期间培养液2-3天更换1次)

 

冻存95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。维持培养液用含2%血清的MEM即可,10%用于加速生长

 

特点HEK293贴壁能力非常差,所以培养皿的质量很重要,每次传代时换新的培养皿。

传代后24h内不要移动和观察细胞,否则细胞容易漂。

HEK293的传代次数超过30代以后,状态会变差,需要重新复苏培养。

 

培养:DMEM 10%血清。

 

MRC-5 细胞-人胚肺成纤维细胞

 

传代:1:3

 

 

 

 

HUVEC细胞:人脐静脉内皮细胞

培养: DMEM (+) 10%

冻存:血清:DMSO=9:1 一皿冻成3管。

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