MTT 实验步骤

MTT 实验步骤

MTT： 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，汉语化学名为 3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5- 二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。

• 原理:

MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（ Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

MTT 是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素 C 的作用下，生成蓝色的 formazan 结晶。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490 nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

• 细胞存活率细胞密度：每孔5000-10000个,每孔100 uL，即(5～10)×104/mL。