地高辛标记探针技术

1 概述

1988年，德国人Dooley等首次用地高辛标记的探针检测了结合DNA的蛋白质，这种方法操作方便、干扰少，可以在两天内出现结果。DIG系统是在多种应用中标记和检测核酸的首选非放射性技术。该系统基于从洋地黄植物（紫毛地黄和狭叶毛地黄）中分离的类固醇，这些植物是地高辛的唯一天然来源，因此抗DIG抗体不与其他生物材料结合，可确保特异性标记。

地高辛分子化学结构（左）及三维结构（右）

地高辛配基标记的核酸探针技术，具有较高的灵敏度，也克服了放射性同位素标记技术所固有的缺陷以及生物素系统的不足之处，加上本身方法的不断改进，日益显示出优越性和广泛的应用前景。地高辛配基标记核酸探针自应用以来，迅速地从检测蛋白质推广到检测细菌、病毒等微生物，甚至开始检测肿瘤和各种激素，逐渐取代了放射性标记探针和生物素标记探针。目前地高辛配基检测体系已广泛用于核酸研究分析的各个方面，如Southern印迹检测特定基因组序列、进行RFLP分析用于基因诊断、基因表达、菌落或噬菌斑原位杂交、固定细胞及中期染色体原位杂交以及生物体液中病毒DNA序列的检测。

以下简要介绍几种常用的地高辛标记物及标记方法和检测原理。

2 地高辛标记物

地高辛配基标记核酸探针方法很多，不同标记方法使用的地高辛标记物各不相同，常用的地高辛标记物有DIG-NHS、DIG-MAL、DIG-11-dUTP等。

名称	结构	标记位置
Digoxigenin NHS ester (DIG-NHS)