常见的色谱法有哪些?分别有哪些特点?
纸色谱——浸泡在液体中的纸用作固定相,而液体溶剂用作流动相。纸张干燥后,分离的成分会在纸上显示为斑点。
液相色谱——该技术使用二氧化硅和氧化铝作为固定相,有机溶剂作为流动相。
薄层色谱法——在这里,塑料或玻璃片上涂有一薄层吸附剂,如氧化铝(Al2O3)或二氧化硅(SiO2)。组分根据其对吸附剂的亲和力进行分离,并在色谱分离后在纸上显示为单个斑点。
柱色谱——柱色谱类似于薄层色谱,使用相同的固定相和流动相。不同之处在于,两个相都包含在一个垂直的玻璃柱中,分离过程非常耗时。
气相色谱——在气相色谱中,惰性气体(氦气、氮气、氩气)用作流动相,通常由硅聚合物组成的固体或液体作为固定相。样品混合物被引入衬有固定相的柱中,并被选择性吸附。当分离的分子离开色谱柱时,使用检测器进行识别。
高效液相色谱——高效液相色谱是柱色谱的高级形式。在高效液相色谱中,样品混合物被引入流动相(通常是溶剂),然后在高压下将其泵入紧密填充的分析柱中,以快速分离样品分子。这种分离依赖于分子对流动相和包裹柱(固定相)的颗粒的亲和力。也叫高压液相色谱。亲和色谱–该方法用于根据不同同源成分(如酶和底物、抗原和抗体或受体和配体)之间的特定亲和力分离生化混合物。
离子交换色谱——这是根据离子和极性分子对离子交换剂的亲和力来分离离子和极性分子。它有助于蛋白质、氨基酸和核苷酸等带电分子的分离。这里,流动相通常是导电溶液(由盐浓度决定)。样品分子对带相反电荷的固体支持物的吸附由特定的离子性质驱动,例如分子上电荷的数量和位置。
分离包括不同的条件,如离子强度和酸碱度,以便溶质分子按其结合强度的顺序从柱中释放出来,弱结合的物质首先被洗脱。