什么是UPLC？和HPLC有什么区别？

最新推荐文章于 2024-07-28 11:58:46 发布

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UPLC（超高效液相色谱）和HPLC（高效液相色谱）的主要区别在于压力、速度和效率。UPLC通过使用更小的颗粒和更高压力提供更快的分析速度、更高分辨率和灵敏度，但对设备要求更高。HPLC是传统方法，适合大多数常规分析。维护UPLC时，需注意溶液和色谱柱的准备，以及系统的清洁和保养。在选择UPLC或HPLC时，需考虑样品量、分析需求和成本预算。

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UPLC：超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography）

色谱理论认为提高色谱柱的效能（efficiency）就能增加仪器的解析度（resolution），而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法。但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直的色谱仪器科学的瓶颈，因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如9000psi），需要更小的系统体积（死体积），并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。

UHPLC：超高效液相色谱 (Ultra-High Performance Liquid Chromatography)

特点是工作压力超过6000 psi或工作温度超过环境温度的应用。由于 UHPLC 应用中使用的硬件通常可以承受 9000 psi或更高的系统压力，因此色谱工作人员可以使用由更高级固相（其颗粒远远小于传统的5 μm直径硅胶）填充的色谱柱。采用颗粒更小的固相不仅可以实现更高的分辨率，同时还能缩短整体分析时间。

HPLC：高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography）

又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

以下几幅图更直观的告诉我们区别何在：

UPLC和HPLC的区别

与传统的高效液相色谱(HPLC)相比，UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸品质的同时，保留其原有的实用性及原理。

其最显著的优势是可以缩短分析时间，提高工作效率。

使用UPLC确实能明显缩短分析时间，提高效率（如某有关物质分析方法，使用HPLC运行一针是75分钟，UPLC完全可以在10分钟内搞定），分析效率提高将近7.5倍。

当然了，分析效率提高这么多，其配套设备肯定也不是闹着玩的。UPLC需要小颗粒杂化填料（1.7um）的色谱柱、更高耐压（达15000Psi）、低系统体积的输液单元。

学会正确维护UPLC，避免被领导骂。

溶液的制备很关键

在色谱系统中，溶液是一个更重要的部分，那么UPLC中溶液的制备应该是怎样的呢？

样品溶液的制备

样品的制备同样是过滤和离心两种方法。

过滤：根据样品溶液的极性，选择不同材质的0.22um滤膜过滤。