细胞STR的鉴定目的是确保细胞遗传身份的真实性与一致性,通过科学严谨的STR分型技术,实现对细胞系的准确鉴定、质量控制及合规性管理,支持生物医学研究、细胞治疗及生物制品开发的可靠性、安全性和透明度,同时促进科研诚信与伦理审查的严格遵循。
重要定义:
1.STR:全称短串联重复序列(Short Tandem Repeats),是指在基因组DNA中重复出现的短序列,由长度为1~6个(也有说法认为是2~7个或3~7个)碱基对的短串连重复序列组成。这些重复序列广泛存在于人类基因组中,在不同个体之间,同一位点的重复次数可以有很大差异,这种变异使得STR成为非常有用的遗传标记,被称为细胞的DNA指纹。
2.细胞STR鉴定:即通过STR信息建立细胞系的遗传特性,主要基于多重PCR(聚合酶链式反应)结合荧光探针检测技术,对人源多个STR位点进行检测。通过对人源细胞特定数量(如21个)的STR位点进行检测,并与权威数据库进行比对,可以推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称,从而检测细胞是否发生交叉污染现象。
那么,得到了STR的分型结果之后,如何进行数据库比对呢?这里展示ExPasy数据库的比对。
且看下方操作流程
1、登录ExPasy网址CLASTR
2、这里展示Example,也可以通过点击Load File自己导入位点分型文件,数据格式为GeneMapper分析软件的输出格式。
3、点击Search,得到比对结果,比对结果也可以点击【Export table】导出。
4、结果主要看第三列的匹配位点数和第四列的匹配得分Score,通常选择匹配位点数多且匹配得分高的结果。