JC-1 (CBIC2) 是一种荧光亲脂性羰花青染料 | MedChemExpress (MCE)

JC-1

CAS：3520-43-2

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture and light

生物活性：JC-1 (CBIC2) 是一种荧光亲脂性羰花青染料，用于测量线粒体膜电位。 JC-1 在高 ΔΨm 处形成称为 J-聚集体的复合物。 JC-1 的聚集体发出橙红色荧光 (Ex/Em=585/590 nm)。在具有低 ΔΨm 的细胞中，JC-1 保持单体形式。 JC-1 单体发出绿色荧光 (Ex/Em=510/527 nm)。

体外：指南（以下是我们推荐的方案，本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改）。
细胞标记：
1. 在 6、12、24 或 96 孔板中以 5×105 细胞/mL 的密度培养细胞。根据您的正常方案孵育细胞。
2. 确保 JC-1 和 DMSO 已平衡至室温，然后将一小瓶内容物溶解在提供的 DMSO 中，制备 200 μM 储备液。
3. 对于对照管，让CCCP 小瓶达到室温，加入1 μL CCCP (50 mM)。在 37°C 下孵育细胞 5 分钟。
4. 每孔加入10 μL JC-1 (200 μM)，使终浓度为2 μM。在 37°C、5% CO2 下孵育细胞 15-20 分钟。如果后面有附加标签，例如使用膜联蛋白 V，则从步骤 2.a 开始。如果不是，请继续执行步骤 1.e。
5. 孵育后，4℃，400×g离心细胞3-4分钟，小心吸去上清液。
6. PBS(1×)洗细胞2次：加入2mL PBS(1×)重悬细胞，涡旋混匀。在 4°C 下以 400×g 离心细胞 3-4 分钟，小心吸出上清液。
7. 加入500 μL PBS（1×）悬浮细胞。在流式细胞仪、荧光显微镜或荧光酶标仪上分析样本。

参考文献：

[1]. A Perelman, et al. JC-1: alternative excitation wavelengths facilitate mitochondrial membrane potential cytometry. Cell Death Dis. 2012 Nov 22;3:e430.
[2]. Vera C. Keil, et al. Ratiometric high-resolution imaging of JC-1 fluorescence reveals the subcellular heterogeneity of astrocytic mitochondria. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology. 2011,462(5): 693-708.
[3]. Jung-Ho LEE, et al. Real-time analysis of amyloid fibril formation of α-synuclein using a fibrillation-state-specific fluorescent probe of JC-1. Biochem. J. 2009, 418:311-323.
[4]. Salvioli S, et al. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis. FEBS Lett. 1997 Jul 7;411(1):77-82.
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