一、试剂描述
MitoTracker Red CMXRos是一种红色荧光染料,用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。经醛固定后染料保留良好。
其作用机制如下:
线粒体靶向性
通过被动运输穿过细胞膜,依赖线粒体膜电位(Δψ)在线粒体内聚集。其弱巯基反应性的氯甲基官能团与线粒体内蛋白的巯基形成共价键,即使膜电位丧失或细胞固定后仍保留在线粒体中。
与膜电位的关系
荧光强度与线粒体膜电位正相关,膜电位下降(如细胞凋亡时)会导致荧光减弱。
与传统染料的对比
传统染料(如TMRM、罗丹明123)在膜电位丧失后易被洗脱,而MitoTracker Red CMXRos因共价结合特性可耐受固定和透化处理,适用于需后续免疫染色或化合物处理的实验。
二、物理参数
【英文名称】:MitoTracker Red CMXRos
【CAS NO】:167095-09-2
【分子式】:C32H32Cl2N2O
【分子量】:531.52
【纯度】:≥95%
【储存条件】:-20℃避光干燥
三、使用方法
染色后的固定和透化流程
1) 染色后,用新鲜预热的缓冲液或生长培养基清洗细胞;
2) 小心吸掉覆盖细胞的缓冲液或培养基,用含2-4%多聚甲醛的新鲜配制预热的缓冲液或培养基来固定。
3) 固定之后,用缓冲液清洗细胞几次;
4) 若后续步骤如ICC需要透化,则用含表面活性剂如Triton X-100的缓冲液来透化细胞。一旦透化结束,用缓冲液清洗细胞并进行后续ICC流程。
5) 作为备选方案,细胞也可以用冰丙酮透化处理5min,之后用PBS清洗。即使后续细胞不用进行其它抗体标记,这一丙酮透化步骤也可能改善信噪比。
四、试剂结构
五、相关试剂
Dihydroethidium(DHE)二氢乙锭
DL-Propargylglycine(hydrochloride)
GYY4137(H2SDonor)硫化氢供体
WSP-1(H2S Probe)硫化氢荧光探针
WSP-5(H2S Probe)硫化氢荧光探针
CAY10731(H2S Probe)硫化氢荧光探针
DL-Propargylglycine DL-炔丙基甘氨酸
MitoTrackerRedCMXRos红色线粒体荧光探针
MitoTracker GreenFM绿色线粒体荧光探针
MitoTrackerDeepRedFM深红色线粒体荧光探针
PSP (Hydrogen Polysulfide Probe)多硫化氢荧光探针
TopFluor Cholesterol:高灵敏度胆固醇荧光探针
diSulfo-ICG Me-tetrazine/水溶性ICG Me-tetrazide
ZnAF-2 DA,Cell Permeant锌离子荧光探针 357339-96-9
ZnAF-2,Cell lmpermeant锌离子荧光探针 321859-11-4
MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator线粒体脂质过氧化
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特别提示:该试剂仅供科研机构实验室使用,严禁用于临床诊疗及食品领域!