Cal-590 AM，Cell Permeant，良好信噪比的胞内钙流测定用探针

一、试剂描述

Cal-590是细胞内钙流测定用荧光探针，与传统的钙离子探针相比，具有良好的的信噪比和细胞内滞留性。

Cal-590 AM具有细胞膜渗透性，能够预加载进入细胞。一旦与钙离子结合后，它们的荧光会加强。

当细胞被激动剂刺激后，受体发出细胞内钙释放的信号，从而使Cal-590的荧光增加。

Cal-590 AM的高灵敏度使其成为胞内钙离子测定的探针。Cal-590也与大多数荧光仪器兼容。

二、物理参数

【英文名称】：Cal-590 AM，Cell Permeant

【其他名称】：Cal-590，Acetoxymethyl Ester

【分子量】：1266.81

【Ex/Em】：574/588nm

【溶解性】：DMSO

【解离常数】：Kd =561 nM

【纯度】：≥95%

【储存条件】：-20℃避光干燥

三、使用方法

【试剂准备】

（1）配制Pluronic F-127母液：称取100mg Pluronic F-127粉末，加入500ul DMSO，配制成20母液，溶解过程需要在40-50°C加热20-30min。

溶液室温保存，不用冷藏。如有结晶析出，可以重新加热后溶解，不影响使用。

（2）HHBS Buffer 或者其他生理缓中液。

【操作步骤】

（1）用无水DMSO溶解Ca1-590 AM配制成2-5mM的储存液，或将已配好的Cal-590 AM储存液取出于室温回温。

（2）用HHBS或其他生理缓中液将Cal-590 AM+DMSO储存液稀释到含0.04% Pluronic F-127的10-20uM染色工作液。

（3）如果细胞内含有机明离子转运体，丙磺舒可能需要入上述染色工作液内，降低去酯化探针的泄露水平。

（4）加入等体积的染色工作液到细胞培养孔内，37°c孵育60-90min。然后，室温再育30min。

（5）吸掉染色工作液，并用HHBS或其他生理缓冲液剂清洗细胞1~2次，以去除残留探。

（6）之后在HHBS或其他生理缓冲液中，用激发/发射波长来检测荧光。

四、试剂图

五、注意事项

1） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2） 乙酰氧基甲基酯（AM）易吸潮，冰箱取出后请在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。

3） Cal-590, AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可在20-25℃温育片刻至全部溶解后使用。

4） Cal-590, AM第一次使用，建议储存液现配现用，分装成单次用量，严格做到≤-20℃密封干燥冻存，以防止受潮。为了保证良好的实验效果，尽量在短时间内使 用。

5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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本文章（以上资料）由西安强化生物科技xxn编写！

特别提示：该试剂仅供科研机构实验室使用，严禁用于临床诊疗及食品领域！