黄璐琦院士/高伟教授 | 减肥药雷公藤红素生物合成研究取得新突破

       2024年1月26日，中国中医科学院中药资源中心 黄璐琦（院士）/首都医科大学 高伟（教授）团队在国际著名学术期刊《天然产物杂志》Journal of Natural Products 发表一项最新研究成果，题为：Characterization of the Cytochrome P450 CYP716C52 in Celastrol Biosynthesis and Its Applications in Engineered Saccharomyces cerevisiae。

      雷公藤红素（Celastrol）是一种生物活性五环三萜类化合物，具有抗癌、减肥等活性，因其出色的治疗潜力而备受关注。雷公藤红素主要分布于卫矛科（Celastraceae）植物中，如雷公藤（Tripterygium wilfordii）、东北雷公藤（Tripterygium regelii）等。高伟教授（已故，惋惜！）团队深耕于雷公藤萜类活性成分（如雷公藤甲素、雷公藤红素等）的生物合成研究，硕果累累，前期该团队尽管已报道了参与雷公藤红素生物合成的关键木栓烷型三萜（Friedelane-type）骨架合成酶（Doi: 10.1111/nph.15809），但其生物合成中的多个后修饰步骤仍未阐明。

      本研究中，在前期研究积累的基础上，作者整合卫矛科多个物种的转录组和代谢组数据，旨在筛选与雷公藤红素生物合成密切相关的CYP450s（CYPs）。借助成熟的酿酒酵母异源表达系统，对31个候选CYPs进行了活性扫描，其中，来自于雷公藤的CYP716亚家族酶TwCYP716C52被发现能够介导雷公藤红素前体美登木酸（Polpunonic acid）的C-2位氧化，形成雷公藤酸C（Wilforic acid C）。通过在雷公藤悬浮细胞中对TwCYP716C52进行 RNAi 沉默进一步确证其参与雷公藤红素的生物合成。结合分子对接和定点突变实验，作者对TwCYP716C52的C-2位催化机制进行了深入探究。此外，作者采用模块化优化策略（Modular optimization strategy）构建了一种工程酵母，实现了雷公藤酸C的异源高产，产量达到 5.8 mg/L。

      总之，本研究将雷公藤红素生物合成解析向前推进了一步，为后续酶的发现提供了重要的功能基因元件和充足的前体。

Fig. 1 Heatmaps of CYPs specifically expressed in the roots of four plants (RB: root bark; RX: root xylem; RP: root phloem; PS: peeled stem; SB: stem periderm; L: leaf; F: flower; R: root; S: stem).

Fig. 2 Phylogenetic tree of CYPs from different families.

Fig. 3 UPLC/Q-TOF-MS analysis of extracts from yeast cultures.

Fig. 4 Analysis of the potential biological function of TwCYP716C52 in celastrol biosynthesis.

Fig. 5 Comparison of relative yields of wilforic acid C produced by wild-type TwCYP716C52 (WT) and its mutants (n = 3).

Fig. 6 Wilforic acid C production of the engineered yeast.

原文信息：Lu, Y., Liu, Y., Zhang, Y., Gao, H., Chen, X., Tu, L., Luo, Y., Jiang, Z., Yin, Y., Zhou, J., Hu, T., Wu, X., Wang, J., Gao, W., & Huang, L. (2024). Characterization of the Cytochrome P450 CYP716C52 in Celastrol Biosynthesis and Its Applications in Engineered Saccharomyces cerevisiae. Journal of natural products, doi: 10.1021/acs.jnatprod.3c00674.

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