Olaparib (AZD2281； KU0059436) 是一种有效的口服活性 PARP 抑制剂 |MCE

中文名：奥拉帕尼

CAS：763113-22-0

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Olaparib (AZD2281; KU0059436) 是一种有效的口服活性 PARP 抑制剂，对 PARP1< 的 IC50 分别为 5 和 1 nM / 和 PARP2。奥拉帕尼是一种自噬和线粒体自噬激活剂[1][2][3][4]。 IC50 和目标：IC50：5/1 nM (PARP-1/2)[1] 

体外：Olaparib (AZD2281) 是 PARP-1 和 PARP-2 的个位数纳摩尔抑制剂，对 BRCA1 缺陷型乳腺癌细胞系显示出独立的活性。将 Olaparib 应用于 SW620 细胞裂解物，确定 PARP-1 抑制的 IC50 约为 6 nM，PARP-1 活性的总消融浓度为 30−100 nM[1]。

体内：携带 SW620 异种移植肿瘤的动物用奥拉帕尼（10 毫克/千克，口服）与 NSC 362856（TMZ）（50 毫克/千克，口服）联合治疗，每天一次，连续 5 天，之后让肿瘤生长<支持>[1]。 Olaparib 增加在 DWC 模型中建立的 Calu-6 肿瘤的血管灌注。奥拉帕尼（50 毫克/千克，口服）作为单一药物（上图）或与放疗联合使用（下图）导致 Calu-6 肿瘤的荧光强度增加[2]。

激酶试验：该测定确定了奥拉帕尼抑制 PARP-1 酶活性的能力。 PARP-2 活性抑制是通过使用 PARP-1 测定的变体来测量的，其中 PARP-2 蛋白（重组）在 96 孔白壁板中被 PARP-2 特异性抗体结合。添加 3H-NAD+ DNA 后测量 PARP-2 活性。洗涤后，添加闪烁剂以测量 3H 掺入的核糖基化。对于 tankyrase-1，开发了一种 AlphaScreen 测定法，其中将 HIS 标记的重组 TANK-1 蛋白与生物素化 NAD+ 在 384 孔 ProxiPlate 测定法中孵育。添加 Alpha 珠子以结合 HIS 和生物素标签以产生邻近信号，而 TANK-1 活性的抑制与该信号的丢失成正比。所有实验至少重复三次[1]。

细胞试验：PF50值是增效因子，计算为使用烷化剂甲基磺酸甲酯(MMS)的对照生长的IC50除以MMS与PARP抑制剂组合的IC50的比率。使用 HeLa B 细胞，并在固定的 200 nM 浓度下测试奥拉帕尼，以进行 MMS 筛选。在 SW620 结直肠细胞系上测试奥拉帕尼时，使用的浓度为 1、3、10、100 和 300 nM。使用磺基罗丹明 B (SRB) 测定法评估细胞生长[1]。

动物体内实验:小鼠[2] 携带 220-250 mm3 肿瘤的小鼠被随机分为 4 个治疗组 (n=5)：A；A；载体对照（10% DMSO 的 PBS/10% 2-羟丙基-β-环糊精，每天口服管饲，持续 5 天），B；奥拉帕尼（50 mg/kg，每天口服，持续 5 天），C； 10 Gy 分割放疗（每天 2 Gy，持续 5 天），D；奥拉帕尼和 10 Gy (5×2 Gy) 分割放疗（每天 2 Gy 剂量的放疗前 30 分钟给予奥拉帕尼）。每天测量肿瘤体积直至达到 1000 mm3。对于每组中的个体肿瘤，计算从治疗开始起每个个体肿瘤大小变为四倍的天数（相对肿瘤体积×4；RTV4）。

 参考详情：www.medchemexpress.cn/Olaparib.html

参考文献：

[1]. Menear KA, et al. 4-[3-(4-cyclopropanecarbonylpiperazine-1-carbonyl)-4-fluorobenzyl]-2H-phthalazin-1-one: a novel bioavailable inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase-1. J Med Chem. 2008 Oct 23;51(20):6581-91

[2]. Senra JM, et al. Inhibition of PARP-1 by olaparib (AZD2281) increases the radiosensitivity of a lung tumor xenograft.Mol Cancer Ther. 2011 Oct;10(10):1949-58.

[3]. Yasukawa M, et al. Synergetic Effects of PARP Inhibitor AZD2281 in Oral Squamous Cell Carcinoma in Vitro and in Vivo. Int J Mol Sci. 2016 Feb 24;17(3):272.

[4]. Bian X, et al. PTEN deficiency sensitizes endometrioid endometrial cancer to compound PARP-PI3K inhibition but not PARP inhibition as monotherapy. Oncogene. 2018 Jan 18;37(3):341-351.