bam文件读取_生物信息学分析实用小技巧(六):BAM/SAM中的雪茄值

BAM/SAM文件两三事

写在前面的

上期推文主要解读了BAM文件的Flags值,通过一个perl程序快速批量翻译Flags值。flags详细记录了reads的比对信息。是由一堆2的n次方(n=0~11)加和组成。例如某条reads经过比对后的flags是83, 83= 1+2+16+64转化为2进制为1010011, 则代表这是一条双端测序的Read1,该reads及其对应reads都是正常比对且当前reads是反向互补后比对上的参考基因组。而perl程序就是基于这个基本思路,通过构建10进制转2进制进行Flags值计算的。虽然已经有flags值计算器了。但是通过编写这些程序会加深对BAM文件的理解。从而加深对生物信息学数据的理解。

CIGAR值的解读

CIGAR是Compact Idiosyncratic Gapped Alignment Report的首字母缩写,是也是记录了reads比对到参考基因组上的字符串。只不过这个字符串是由数字+字母组合成的字符串。与Flags值不同的是CIGAR记录的是每条reads内部每个部分的比对情况。而Flags值则是记录每条reads总体的比对情况。与Flags值相比,CIGAR值对于reads比对的细节记录的更详细。那么,在对CIGAR值有了初步的了解以后,我们继续深入了解这个值的意义。由于CIGAR值是由数字+字母构成的字符串,那么下面这张来自于碱基旷工的图则清晰的阐明了CIGAR值中出现的每个字母的比对含义。

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举例而言,如果一条250bp的reads在BAM文件中的CIGAR值记录为50S100M10D100M,那么则表示这条reads的前50bp被跳过,中间100M比对上了参考基因组,后100bp也比对上了参考基因组。但是中间100M和后面100M则在比对参考基因组时出现了一个10bp的gap。也就是参考基因组上有10bp是这条reads没有的,

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根据您提供的信息,当在 JBrowse 浏览器页面上创建 `alignment` 轨道后,诊断信息显示 HTTP 403 错误。错误信息指出在获取 `http://192.168.211.234:7777//default/files/jbrowse/persea_americana__avocados_1/data/bam/pame.hifi.bam.bai` 时出现了权限问题。 HTTP 403 错误表示服务器拒绝了请求,通常是由于缺乏访问权限或身份验证失败引起的。在您提供的 URL ,我们可以看到 `pame.hifi.bam.bai` 文件的路径。 要解决这个问题,可以尝试以下步骤: 1. 检查文件路径和名称:确保所提供的路径和文件名正确无误。确认文件是否存在,并检查文件所在目录的权限设置。 2. 检查服务器权限:确保服务器上的相关文件或目录具有适当的权限,以允许 JBrowse 浏览器访问和读取这些文件。检查文件所在目录的权限设置,并确保对该目录的访问权限正确配置。 3. 身份验证问题:如果您的服务器需要身份验证才能访问文件,请确保您提供了正确的凭据(用户名和密码等)。 4. 检查服务器日志:查看服务器日志以获取更多详细信息,以确定引起 HTTP 403 错误的具体原因。服务器日志通常位于服务器的日志文件,可以提供有关访问错误的更多信息。 请注意,这些步骤可能需要根据您的具体环境和服务器配置进行调整。 如果问题仍然存在,请提供更多详细信息,例如服务器配置、文件路径和相关代码,以便我能够更准确地帮助您解决问题。
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