实验设计

重复磁刺激技术自1985年问世以来，其发展不可谓不迅速，无创、无痛的特点使其具有巨大的潜力。我在之前写的综述提到了重复经颅磁刺激技术的瓶颈问题：作用机制、最优参数。目前重复磁刺激技术广泛地应用于神经退行性疾病、中枢系统损伤等神经相关类型疾病的治疗。TMS的作用机制的探究，大致分为这样几种观点：1 TMS通过调节神经递质的释放进而促进损伤大脑功能的恢复；2 TMS通过提高大脑的可塑性，促进大脑功能的自我改善； 3 TMS通过平衡大脑两半球之间兴奋/抑制竞争而产生作用； 4 TMS通过作用于神经环路而发挥疗效；目前关于神经环路机制的研究是热点问题。它包含许多参数：频率、强度、脉冲数、时长等等。有研究显示，频率是最重要的参数，一般认为≥1Hz为高频，低于1Hz为低频。在体实验中，强度的选择以被试者静息运动阈值为100%，分为阈上（>100%）、阈下(<100%)两种。由于在体实验的个体差异性和局限性，很难设置各个梯度的参数来寻找最优参数。重复经颅磁刺激体外实验研究，多建立神经元模型，非常有助于探讨其作用机制，为临床研究提供理论支持。但体外实验最终还是要回到临床中去，这就要求研究者在设计实验时，充分考虑到回归问题。
实验设计涉及2个关键问题，一是参数的选取，一是测量指标。这也是阅读文献时重点关注的问题。我们所进行的实验探究是在认知功能这个大环境下进行的，这就要求测量指标必须可用来反映认知功能的变化。如，探究TMS对帕金森患者认知功能改善的作用机制时，许多研究人员测量了多巴胺、去甲肾上腺素等的水平。这是因为多巴胺这种神经递质与帕金森病存在着密切联系。关于TMS的体外实验研究实在是屈指可数，大概找了10篇比较相关的paper。在阅读的同时做了个表格：
这对我设定刺激参数提供了很大的帮助，目前参数已经基本确定。今天和导师沟通了一下相关问题。他希望我做一个文档出来，大家可以在组会上一起讨论。接下来要重点关注测量参数及实验技术的问题。我初步的想法是分化前测MTT、DA、NE、HVA、ROS，诱导分化后测β-微管蛋白、动作电位、ROS，凋亡实验测ROS。凋亡实验要测量指标还需再总结。我实验室生物实验基础弱，许多大型贵重设备短缺。比如，测ROS要用的流体细胞仪、测许多神经递质都要用到的高效液相色谱仪等等。目前的解决方案是送出去检测，或者改变检测方法用我们现有的设备检测。
后天是省部共建电工装备可靠性与智能化国家重点实验学术年会，明天要做准备工作，且要在实验室改装水池。在完成上述任务之后，明天的工作将集中在对神经递质相关知识及测量方法的查找。