免疫磁珠分选原理（链霉亲和素磁珠/链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）/免疫沉淀磁珠Protein A/G)

免疫磁珠分选原理（链霉亲和素磁珠/链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）/免疫沉淀磁珠Protein A/G)

• 磁珠分选原理

磁珠分选是基于细胞表面抗原能与偶联抗体的磁珠特异性结合，从而使细胞被标记。标记好的细胞过柱子（柱子周围连磁铁）时，带磁珠的细胞就留在柱子上，不带磁珠的细胞就流走了，从而实现目的细胞的分选。

二、细胞标记方式

利用磁珠分选细胞的关键点就是高质量细胞标记。标记方式有两种，包括直接标记和间接标记。

1、  直接标记

直接标记就是标记目的细胞，是较快速、较特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。

2、  间接标记

间接标记就是标记非目的细胞，需要联合使用单克隆或多克隆抗体和微珠。未结合抗体、生物、生物素化抗体或荧光素标记抗体均可作为一抗标记细胞，再使用抗免疫球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠等作为二抗磁性标记细胞。

三、磁珠分选策略

根据细胞标记方式可以选择不同的磁珠分选策略。

1阳性分选

阳性分选是目的细胞被磁性标记，并直接分选出来，标记的细胞可富集10000倍。分选后的细胞不必去除微珠，可立即培养或后续操作，其优势是纯度高，回收率高，操作迅速，操作简便。

2阴性分选

阴性分选又叫去除分选，磁性标记非目的细胞，从而将非目的细胞从细胞混合物中去除。其适用范围包括以下几个方面：

① 去除不需要细胞；

② 缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞）；

③ 不需要抗体和目的细胞结合，如T细胞、B细胞、NK细胞功能分析；

④ 需要进一步通过阳性选择分选细胞亚群。