番茄镰刀枯萎病的3个生理小种

摘要：

番茄枯萎病是一种导致番茄严重减产的土传病害。它的分子特性描述以及与宿主的相互作用对于病害的防治非常重要。作者分离了20株不同的FOL菌株，它们被用于培养，形态学观察，分子和毒力实验。研究结果显示所有菌株都产生不同大小的大小孢子，细胞，培养物的颜色以及生长状态都不同。FO物种特异性PCR扩增出了600bp的显著片段。FOL-8被鉴定为高毒力菌株，FOL-20被鉴定为低毒力菌株。蛋白组学用于鉴定FOL-8和FOL-20的毒力差异蛋白。2D分析显示他们有17个不同的蛋白，其中3个蛋白从fol-8到FOL-20被下调，14个蛋白被上调。分析显示这些蛋白与致病性，症状表现以及病情发展相关。本研究揭示了枯萎病的致病机制。

实验设计：

为了鉴定菌株毒力，作者通过 叶片损伤实验（ILD！！Beyeand Lafay (1985) ） 鉴定菌株的毒力。该准则共分5个等级（0-4）0是无症状的叶片；1是叶子枯萎，2是叶子中度黄化；3是叶子坏死；4是叶子死亡。ILD根据发病等级划分，ILD = grades/max grade，根据ILD得分共分为less virulent (+), moderately virulent (++), and highly virulent (+ + +)四个等级.

用(IGS) region in the FOL genome. The primers FIGS 1 - 5′- GTAAGCCGTCCTTCGCCTCG-3′ and FIGS 2 - 5′-GCCATACTATTGAAT TTT GC-3′引物来特异性扩增FOL（94◦C for 5 min, 35 cycles of

amplification (30 s for denaturation at 94◦C, 30 s for primer annealing at 59◦C and 1 min for extension at 72◦C)）最后是总蛋白提取以及2D-Page Analysis 。

参考文献：

Di Pietro and Roncero, 1998; Kawabe et al., 2005; Leslie and Summerell, 2006; Takken and Rep, 2010）

Manikandan, R., Harish, S., Karthikeyan, G., & Raguchander, T. (2018). Comparative Proteomic Analysis of Different Isolates of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici to Exploit the Differentially Expressed Proteins Responsible for Virulence on Tomato Plants.  Frontiers in microbiology ,  9 , 420.