一个针对FLT3中驱动突变的T细胞受体在体内介导了白血病的消除

今天给同学们分享一篇实验文章“A T cell receptor targeting a recurrent driver mutation in FLT3 mediates elimination of primary human acute myeloid leukemia in vivo”，这篇文章发表在Nat Cancer期刊上，影响因子为22.7。

结果解读：

从健康供体T细胞中诱导FLT3 D835Y -反应性T细胞

来自16名HLA-A2阳性健康献血者的幼稚T细胞与自体单核细胞源性树突状细胞（moDCs）共培养，这些树突状细胞经过电穿孔处理，携带编码FLT3突变的9个和10个氨基酸肽的mRNA，这些肽被预测为与HLA-A2强结合（扩展数据图1a）。序列在N-末端和C-末端分别有9-11个氨基酸（目标mRNA，编码KICDFGLARYIMSDSNYVVRGNVRLARLP），或者是对照mRNA。共培养10天后，细胞被染色，使用双色肽-MHC（pMHC）多聚物与非聚合性或十聚合性肽结合，其中FLT3突变位于位置1。只有一个献血者的9个氨基酸反应性CD8 T细胞与多聚物结合，并且只在目标mRNA处理的培养中检测到，并进行了分选。从两个克隆和55个分选、测序的单个细胞中，仅鉴定出一个功能性TCR序列（TCR）（图1b和扩展数据图1b、c）。

TCR FLT3D/Y 识别具有高肽- HLA 稳定性的突变肽

TCR序列通过逆转录病毒转导在第三方PB T细胞中高效表达（图1c）。通过免疫肽组学和靶向质谱分析，证明了其与HLA-A2的结合以及肽段的内源性加工和呈递，使用过表达FLT3突变的单等位基因细胞系作为阳性对照，对来自两名AML患者的原代细胞进行了分析（图1d，使用前体→b2、b3、b4、b5、b6、b7和b8片段离子交易提取的离子色谱图，以及扩展数据图2）。作者先前证明了肽段-HLA稳定性与新抗原免疫原性之间存在强相关性，突变肽段与HLA-A2形成的复合物的半衰期几乎是WT肽段与HLA-A2形成的复合物的十倍（平均为9.9小时对0.83小时，n = 3）（图1e）。与此一致，TCR细胞与呈现突变肽段的pMHC多聚体明亮染色，而不与WT肽段结合（扩展数据图3a）。TCR FLT3D/Y -重定向的CD8 + T细胞的类似部分与FLT3 D/Y pMHC多聚体和抗小鼠TCR-β–PE（对引入到TCR 40 中的小鼠常数区域反应）呈阳性染色，并与抗人类TCR-α呈阴性，表明引入的TCR-α和TCR-β链的优先配对和内源性TCR的抑制（扩展数据图3b,c）。CD8 + 和CD4 + T细胞均表现出主要是天然状态的特征，并且在体外扩增的程度与转导表达对照TCR的T细胞（临床应用的NY-ESO1特异性1G4 TCR 1G4 ）相似，表明没有兄弟杀伤（扩展数据图3d,e）。