干货│步步为赢,ChIP实验攻略(中篇)


导读

上一期,给大家介绍了ChIP实验操作中的染色质制备。本期小编就ChIP实验中的免疫沉淀和DNA纯化进行详细的介绍和细节汇总,让您少走弯路,扎扎实实做好ChIP实验。话不多说,干货呈上。


免疫沉淀

得到合适片段大小的染色质后下一步操作就是免疫沉淀实验。免疫沉淀中抗体是非常关键的一个因素。多克隆、单克隆和重组抗体都可以用于ChIP实验,但是不是所有的抗体都适合ChIP实验,优先选择经过ChIP验证过的抗体。

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免疫沉淀Tips

设置好对照组实验。阴性对照常用抗体同型IgG或标签抗体加入只有标签蛋白载体的样本。

抗体选择非常重要,不是所有抗体都适合做ChIP实验,在WB验证中表现很好的抗体,也可能不适用于ChIP。相比较而言,IF和IHC是在固定条件下进行的,可能用于ChIP实验。建议优先考虑那些专门为ChIP验证过的抗体。

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