无血清培养基的优缺点概述

近年来，随着生物医药技术的快速发展，细胞培养技术广泛应用于免疫学、商业应用和生物制品等多个领域。细胞培养技术可用于分离、增殖和鉴定病毒，也适用于筛选抗癌药物和对有毒物质进行检测等方面的研究。

可以利用细胞培养技术进行大规模生物制品研发，如单克隆抗体、疫苗及重组蛋白的制备、药物开发、干细胞移植、人造器官培养等。因此，细胞培养技术已成为科学研究和医药制品开发的关键因素之一。

细胞培养技术中使用的培养基主要包括合成细胞培养基和天然细胞培养基，其中应用广泛的是天然培养基。血清是一种在体外培养细胞时加入的物质，它是在血浆中去除纤维蛋白原而分离出的一种成分十分复杂的混合物，用于细胞培养的血清主要是牛血清。

 

 

血清中富含细胞生长所必需的营养物质，在细胞培养过程中具有重要作用但实际生产中血清提取工艺复杂，成本高昂，给大规模生产带来困难，不利于商业化开发，且血清成分复杂，无法有效质控，常见细胞源疫苗血清残留对疫苗免疫效果有很大的影响。

疫苗生产多采用M199、DMEM、MEM等培养基加新生牛血清的方式，但由于血清成分的复杂性和不确定性，疫苗生产企业期待新型无血清培养基的上市。近年来，市面上出现了无血清培养基。无血清培养已成为包括疫苗在内的生物技术药物生产的总趋势。由于无血清培养基可完全采用已知分子结构或构型组分的低蛋白, 甚至完全不采用蛋白组分, 因此被广泛应用于细胞工程领域。

缔一生物为您介绍一款可无血清培养的细胞培养基，由国际上HiMedia公司生产M199改良型——SFRE 199细胞培养基。SFRE 199分为I型和II型，即SFRE 199-1和SFRE 199-2。开始研发是为了生长和维持培养Bak细胞（原代狒狒肾细胞）。

SFRE-199将M199标准配方中的精氨酸增加到150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，组氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以获得较好的细胞生长而未表现出毒性。另外，还降低了硝酸铁、黄嘌呤和碳酸氢钠的浓度。SFRE 199-1与SFRE 199-2的不同在于，前者含有Hank's盐，而后者所含为Earle's盐。与加胎牛血清的常规培养基比较，细胞生长速率、产量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天单层细胞达到充分融合。

有报道，在SFRE 199-1生长的原代Bak细胞的群体二倍分裂时间(PDT)约为34.2小时，与加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同，加有3%胎牛血清的M199的PDT为36小时。如果在SFRE 199-1中去除胰岛素或硫酸锌，则细胞不能融合，PDT延长。若含有胰岛素和硫酸锌，则其支持生长的能力相当于标准对照血清培养基。

近年来，无血清培养基的应用越来越广泛，但也各有利弊，本文缔一生物为您介绍无血清培养基的主要优缺点：

优点：

①无血清培养基不含血清，提高了实验的重复性、准确性和稳定性；

②避免了血清所带来的血源性污染等问题，减少血清未知成分对细胞的损伤；

③无血清培养基中的蛋白质来源于重组蛋白或蛋白水解产物，提高了实验效率；

④无血清培养基的成分和含量相对明确，能提高细胞产品的质量并有利于产物的分离提纯；⑤无血清培养基在生物医药等领域有着极大的应用潜能；

⑥制备流程简易，操作简单。

缺点：

①无血清培养基的生产成本较高，不利于商业化开发与应用；

②目前低血清培养基研究开发的相关数据缺乏在线交流，可查阅的资料有限，不能有效促进细胞驯化技术的发展；

③多数无血清培养基的应用不广泛，通用性较低，不具有普遍性；

④细胞在无血清培养基中，对外界条件如物理和化学等因素的改变较敏感。

推荐阅读：《Lonza UltraCULTURE 无血清培养基使用说明》、《淋巴细胞、悬浮细胞分离进展及方法学评估​​​​​​​》​​​​​​​