DNA琼脂糖凝胶电泳实验

如期生物

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原理

琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维，后者再聚合成半径 20~30 nm 的超螺旋结构。

材料与仪器

DNA 样品 DNA 大小标准品

琼脂糖溶液 电泳缓冲液 溴化乙锭或 SYBR Gold 染色液 凝胶载样缓冲液

琼脂糖凝胶电泳仪 封胶带 微波炉或沸水浴 电源装置 水浴

步骤

一、材料

1. 缓冲液和溶液

琼脂糖溶液

电泳缓冲液（常用 1X TAE 或 0.5X TBE)

溴化乙锭或 SYBR Gold 染色液

6X 凝胶载样缓冲液

2. 核酸和寡核苷酸

DNA 样品

DNA 大小标准品

3. 专用设备

琼脂糖凝胶电泳仪

封胶带

微波炉或沸水浴

可以提供 500V 和 200mA 的电源装置

55℃ 水浴

二、方法

1. 用封边带封住塑料托盘开放的两边或清洁干燥的玻璃板的边缘形成一个模具，置一个水平支架上。

2. 配制足量的电泳缓冲液（1X TAE 或 0.5X TBE) 用以灌满电泳槽和配制凝胶。

3. 根据欲分离 DNA 片段大小用电泳缓冲液配制适宜浓度琼脂糖溶液：应准确称量琼脂糖干粉加到盛有定好量的电泳缓冲液的三角烧瓶或玻璃瓶中。

4. 用 Kimwipes 松松地塞住三角烧瓶颈部，如用玻璃瓶一定松松地盖住。在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖