通过生物工程技术提高水稻胚乳营养价值进而改善人体健康

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通过生物工程技术提高水稻胚乳营养价值进而改善人体健康

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文献导读

通过生物工程技术提高水稻胚乳营养价值，进而改善人体健康

文献介绍

英文标题：From Golden Rice to aSTARice: Bioengineering Astaxanthin Biosynthesis in Rice Endosperm

中文标题：从黄金大米到赤晶米：水稻胚乳中虾青素的生物合成

期刊：Molecular Plant; IF=9.326; DOI: 10.1016/j.molp.2018.09.007

作者：刘耀光，华南农业大学教授

主要研究方向：植物育性发育的分子遗传和基因工程研究

摘要

虾青素是一种胡萝卜素合成的最高级别产物，具有强效抗氧化活性类，因此非常有益于人体健康。作者通过在水稻胚乳特异过表达虾青素合成相关基因sZmPSY1, sPaCrtI, sCrBKT, 和 sHpBHY，其中过表达sZmPSY1 和sPaCrtI两个基因可以获得富含β胡萝卜素的黄金大米，过表达sZmPSY1, sPaCrtI 和 sCrBKT三个基因可以获得角黄素大米，过表达sZmPSY1, sPaCrtI, sCrBKT, 和 sHpBHY可以获得虾青素大米，对改善稻米营养价值具有重要作用。

研究背景

虾青素是一类具有强效抗氧化活性的胡萝卜素合成的最高级别产物，人类一般是从海洋生物中获取。类胡萝卜素（包括β-胡萝卜素）的前体主要通过MEP途径产生。虾青素是从β-胡萝卜素经β-胡萝卜素酮酶（BKT）和β-胡萝卜素羟化酶（BHY）途径合成。与BHY基因在高等植物中广泛存在不同，BKT基因仅存在于某些微藻类，细菌和酵母中。因此，大多数高等植物无法产生酮类胡萝卜素，但可产生不同的羟基化类胡萝卜素。有研究人员已经在烟草，胡萝卜，番茄中成功地设计了虾青素的有效生物合成。因此作者希望能够通过在水稻胚乳中转入PSY，CrtI，BKT和BHY四个基因，设计出富含虾青素的水稻品种。

结果分析

1. 水稻胚乳中β-胡萝卜素，角黄素和虾青素生物合成的设计

Fig1. A, 载体的构建 B, 自左到右，分别是野生型、黄金大米二代、角黄素大米、虾青素大米
作者根据之前相关研究推断: 水稻胚乳中虾青素的有效从头生物合成可能需要过表达BKT和BHY，以及PSY和CrtI四个基因。作者验证了前人的结果，转入sZmPSY1和sPaCrtI两个基因产生β-胡萝卜素，获得第二代黄金大米。转入sZmPSY1、 sPaCrtI和sCrBKT三个基因伴随着低表达的OsBHY获得角黄素大米。作者推测通过外源转入OsBHY可以获得富含虾青素大米。

2. 黄金大米，角黄素大米和虾青素大米的生成

Fig2. 野生型与虾青素大米的电镜观察
作者成功在水稻种子胚乳合成虾青素后并随之命名这种新型种子为虾青素种子（aSTARice或AR），AR水稻种子颗粒的电子显微镜显示胚乳中有许多油滴（也称为球状体），而糊状细胞的一些质体中含有少量的碎片，可能含有虾青素。然而，我们在野生型中未观察到油滴或塑性球蛋白。
3. 转基因系中转基因的遗传与表达

Fig3. 野生型，角黄素大米，虾青素大米中PSY, CrtI, BHY, and BKT基因表达分析
遗传分析表明，作者获得无纯合标记的转基因虾青素种子（aSTARice或AR），除籽粒颜色外，AR品系与亲本没有明显的表型差异，包括颗粒形状和谷粒重量。定量分析结果表明，AR品系相比野生型PSY, CrtI, BHY, and BKT基因表达明显升高。
4. 转基因系中类胡萝卜素的组成及其含量

Fig4. 总的类胡萝卜素及虾青素含量的测定
作者使用高效液相色谱（HPLC）分别对野生型及转基因家系中类胡萝卜素和虾青素含量进行测定，结果表明AR品系中虾青素的含量显著高于对照组。结果证明外源转入PSY, CrtI, BHY, and BKT基因可以显著提高稻米营养品质。
5. AR系具有较高水平的抗氧化类胡萝卜素

Fig5. 类胡萝卜素的抗氧化性水平测定
作者使用氧自由基吸收能力（ORAC）方法选择测量了GR，CR和AR品系谷物中代谢组分的Trolox当量抗氧化能力（TEAC）水平。 TEAC值表示代谢产物的总抗氧化活性。发现所有测试的转基因品系均显着高于野生型HG1的抗氧化剂水平。此外，AR品系表现出较高的相对TEAC水平。

创新点

与前人黄金大米相比，作者通过导入虾青素合成的四个基因获得营养价值更高的虾青素大米，为进一步的商业化奠定了基础。

不足之处

虾青素水稻胚乳中虾青素的含量还是较低，也不容易为人体直接吸收。

参考

• 原文链接：https://www.cell.com/molecular-plant/pdf/S1674-2052(18)30302-2.pdf

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