MTT预实验与免疫染色准备

4月5号接种的一批细胞分别于4.07号和4.10号换液,并刺激5天。按照预先的安排,明天是刺激的最后一天,上午9点左右刺激结束,8小时(下午5点)后加MTT,9点加DMSO做光吸收值检测。根据今天的观察,密度为4w/well的细胞,密度略小,今天换液后,今明天可能增殖明显。密度为2w/well的细胞明显偏少。因此,正式试验考虑接种密度为5-6w/well。11号做完MTT,12号上午进用spss进行数据分析,选择合适的刺激强度。今天对SY5Y1:2传代,密度较大,12号约可长满,接种做MTT实验。为加快实验进程,细胞以不同的密度接种,将传代时间错开。做MTT时更有利把握时间。预计25号前做完MTT实验。
近期订购的试剂与药品基本全部到货,今晚和明天要细化试剂的储存分装等的具体操作步骤。包括分装时是否应先稀释,用什么溶液稀释,合适的浓度是多少,用什么瓶子储存;固体粉末用什么溶解,对溶解剂的最终密度有何要求等等。碧云天TPA的说明上未提及诱导的作用,明天打电话问问是否是我们需要的产品,并尽快订购。
这周将1mlEP管、西林瓶、盖玻片和用过的玻璃器具泡酸清洗高压灭菌备用。
下次细胞传代时,接种一批至盖破片与 φ35的培养皿中,放在膜片钳平台看看,等TPA来了做诱导预实验。

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