每当拿到一个质粒图谱,第一反应就是一脸懵,这是什么玩意?这些ori、RBS、tet是什么鬼?这些箭头代表什么,转录的方向吗?为什么都不相同,不会“撞车”么?这玩意究竟怎么看啊?
如何看懂质粒图谱
看懂质粒图谱的4个要点↓↓
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复制起点,它控制着质粒的复制,并决定了质粒的宿主和拷贝数。
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筛选标记,了解筛选标记类型,方便后续确定筛选重组质粒载体的方法。
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多克隆位点,既外源基因的插入位点。
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其他元件,如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等。
第1步 了解质粒图谱中的复制起点
图谱中的ori表示质粒的复制起点。质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关,它是质粒中的一段特定序列,富含AT和重复序列。