MISO 算法:破解多模态空间组学数据,解析组织复杂性|顶刊精析

本文聚焦多模态空间组学数据分析难题,提出MISO(MultI-modal Spatial Omics)算法,旨在解决组织复杂性研究中的关键问题。

多模态空间组学整合多种组学数据,有助于理解细胞定位与组织功能关系,但现有分析方法存在诸多缺陷。*MISO算法通过独特的特征提取和聚类流程,有效整合多模态数据*,在多种生物数据集分析中表现出色。

https://doi.org/10.1038/s41592-024-02574-2

作者类型姓名单位
第一作者Kyle Coleman1. 美国加利福尼亚州洛杉矶市雪松西奈医疗中心计算生物医学系 2. 美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院生物统计学、流行病学和信息学系单细胞和空间基因组学统计中心
通讯作者Kyle Coleman1. 美国加利福尼亚州洛杉矶市雪松西奈医疗中心计算生物医学系 2. 美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院生物统计学、流行病学和信息学系单细胞和空间基因组学统计中心
通讯作者Jian Hu美国佐治亚州亚特兰大市埃默里大学医学院人类遗传学系
通讯作者Mingyao Li1. 美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院生物统计学、流行病学和信息学系单细胞和空间基因组学统计中心 2. 美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院病理学和实验室医学系

MISO算法首先为各模态构建邻接矩阵,利用多层感知器提取低维嵌入,计算模态间交互特征并去除低质量模态特征,最后通过k-means聚类实现空间区域划分。

该算法计算效率高,能处理大规模数据集。*在膀胱癌、胃癌、结直肠癌等多种癌症及小鼠胚胎、海马体等生物样本的多模态数据实验中,MISO准确识别出关键组织和细胞结构*,如膀胱癌中的高内皮微静脉、胃癌中的不同癌组织区域等,且在聚类性能上优于MUSE和SpatialGlue等现有方法。

研究表明,MISO在多模态空间组学分析中具有显著优势,为深入研究组织复杂性和生物机制提供了有力工具。尽管该算法存在一定局限性,如特征提取方法特定、需用户参与部分分析环节等,但未来可通过功能扩展来克服这些问题,有望在空间组学技术发展中发挥更大作用,推动生物医学研究的进步。

一、文献概述

“Resolving tissue complexity by multimodal spatial omics modeling with MISO”发表于Nature Methods,提出MISO算法,可整合多组学和组织学图像数据,有效识别生物相关空间区域,为多模态空间组学分析提供了有力工具。

  1. 研究背景:多模态空间组学技术发展,能在组织原位整合多种组学数据,但现有分析方法存在忽视空间信息、只能整合部分模态、需大量超参数调整且对低质量模态敏感等问题,因此需要新方法来整合多样的空间组学实验信息。

  2. MISO算法

    • 工作流程:先为各模态构建邻接矩阵,用多层感知器提取低维嵌入,计算模态间外积构建交互特征,去除低质量模态特征后,用k-means聚类算法划分区域。
    • 关键步骤:通过过滤低质量模态的嵌入增强分析稳健性;计算模态间交互特征,能捕捉不同模态间影响表型的相互作用。
    • 计算效率:处理中等规模数据集在1分钟内,可有效扩展到大规模数据集,允许评估包含数十万个捕获位置的数据集。
  3. 实验结果

    • 膀胱癌数据:在膀胱癌10x Visium V2数据中,MISO准确识别出高内皮微静脉(HEV)区域,优于SpatialGlue和MUSE,且在基于RNA和组织学数据聚类方面表现出色。
    • 胃癌数据:在胃癌10x Xenium数据中,MISO准确划分组织区域,区分黏附性差的癌和黏膜区域,而MUSE和SpatialGlue因内存限制无法分析。
    • 结直肠癌数据:在结直肠癌10x Visium HD数据中,MISO识别出侵袭性癌的亚类,发现与SPP1+巨噬细胞的共定位关系,而其他方法因内存限制无法分析。
    • 小鼠胚胎数据:在小鼠胚胎(E13)空间ATAC - RNA - seq数据中,MISO区分了端脑不同区域,可视化标记基因表达验证了其准确性,且在t - SNE图中显示出良好的分离效果。
    • 小鼠海马体数据:在小鼠海马体空间转录组和代谢组数据中,MISO准确识别出CA2sp亚区,通过MERFISH全脑图谱验证了其精确性。
    • 人类扁桃体数据:在人类扁桃体空间基因和蛋白质表达数据中,MISO在识别生发中心方面表现优异,F1评分高于MUSE和SpatialGlue。
  4. 研究结论:MISO能整合多模态空间组学实验所有模态,在识别已知生物结构上优于现有方法,但存在特征提取方法局限、需用户解释结果、无法量化模态贡献和自动检测低质量模态等不足。未来计划扩展其功能,以适应空间组学技术发展产生的新数据类型。


二、重点关注

2-1:MISO分析空间多组学数据集的工作流程

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  • 输入模态数据:包括多种组学模态数据和H&E组织学图像数据。
  • 构建邻接矩阵:针对每种模态的数据,构建邻接矩阵,用来表示数据点之间的相邻关系。
  • 编码器和解码器处理:将邻接矩阵和该模态的点级特征作为多层感知器(MLP)的输入,训练多层感知器来最小化光谱聚类和重建损失函数。通过这个过程得到模态特定的嵌入。
  • 构建输入特征:从多层感知器中提取模态特定的嵌入,并计算每对模态之间的相互作用。去除低质量模态的特征。
  • K均值聚类 :将最终的嵌入组作为K均值聚类算法的输入,进行聚类分析,从而划分出不同的组。

2-2:对10x Visium膀胱癌空间转录组数据集的分析

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  • 图a:是分析组织切片的H&E染色组织学图像,标注了三级淋巴结构(TLS1和TLS2)和高内皮微静脉(HEVs)。
  • 图b:展示了所有Visium点的TLS评分。
  • 图c:是使用iStar增强基因表达分辨率后,所有超像素的TLS评分。
  • 图d:比较了MISO、SpatialGlue和MUSE三种方法对TLS1和TLS2的聚类结果。从左到右依次是聚类结果,以及MISO和SpatialGlue的真阳性和假阳性HEV超像素掩模。从中可以看出,MISO在识别HEV方面有较好的表现,能够更准确地区分真阳性和假阳性的HEV超像素 。

2-3:对大规模空间转录组数据集的分析

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胃癌(Xenium)数据集分析

  • 图a:病理学家对组织切片的手动注释,标注了癌聚集体、淋巴样组织等区域。
  • 图b:分别来自黏膜和癌区域的组织学图像块。
  • 图c:MISO聚类结果,通过整合RNA和图像数据区分不同组织区域。
  • 图d:ERBB2基因(胃癌侵袭性标记基因)的空间基因表达图,该基因在癌和黏膜区域表达水平相似。
  • 图e:MISO提取的组织学图像特征,特征23对应黏膜,特征16对应癌。

结直肠癌(Visium HD)数据集分析

  • 图f:病理学家对组织切片的注释,标注了侵袭性癌、正常结肠黏膜等区域。
  • 图g:MISO聚类结果,展示了不同的组织区域聚类。
  • 图h:CEACAM6基因(结直肠癌标记基因)的空间基因表达图,在所有标注的侵袭性癌区域表达水平相似。
  • 图i:SPP1基因(肿瘤特异性巨噬细胞标记基因)的空间基因表达图,该基因与MISO识别的第4簇共定位 。

2-4:对小鼠胚胎(E13)空间ATAC - RNA - seq数据集的分析

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  • 图a:相邻组织切片的H&E染色组织学图像,标记出要分析的区域。
  • 图b:对大脑端脑区域的放大图,标注了脑室区(红色)、 下皮层(橙色)和皮层(粉色)。
  • 图c:对比了MISO、MUSE和SpatialGlue三种方法的聚类结果,可看出MISO在组织区域划分上的表现。
  • 图d:展示了SOX2、GAD2、TBR1等标记基因在RNA和ATAC层面的空间基因表达图,分别对应脑室区、下皮层和皮层的标记基因。
  • 图e:根据RNA或ATAC的t-SNE坐标绘制的点,并按MISO聚类结果着色,从不同维度呈现了数据聚类情况 。 从中可以看出MISO在分析该小鼠胚胎空间多组学数据时,能有效聚类和区分不同组织区域 。

三、数据+代码可用性分析

3-1:数据可用性

本研究分析了以下数据集:

  1. 10x Visium 人类膀胱癌空间转录组数据(GEO GSE246011,样本BLCA-B1);
  2. 10x Xenium 人类胃癌空间转录组数据,数据请求需经Tae Hyun Hwang博士(Taehyun.hwang@vumc.org)和Jeong Hwan Park博士(ruvit21@snu.ac.kr)审核,合理请求在批准后可提供(IRB No. 30-2023-1);
  3. 10x Visium HD 人类结直肠癌数据(链接);
  4. 空间ATAC-RNA-seq 小鼠胚胎第13天(E13)数据,来自Zhang等[5](链接);
  5. 空间转录组与代谢组小鼠冠状脑数据(链接);
  6. 10x Visium 人类扁桃体基因与蛋白质表达数据(链接);
  7. 10x Visium 小鼠前脑空间转录组数据(链接);
  8. 10x Visium 人类乳腺癌空间转录组数据(链接);
  9. 10x Visium 斑马鱼黑色素瘤空间转录组数据,来自Hunter等[41](GSE159709);
  10. 10x Visium 小鼠嗅球空间转录组数据(链接);
  11. 10x Visium 小鼠冠状脑空间转录组数据(链接);
  12. 10x Visium 人类前列腺癌空间转录组数据,来自Erickson等[44](链接);
  13. 空间CUT&Tag-RNA-seq(H3K27AC)小鼠冠状脑数据,来自Zhang等[5](链接);
  14. 空间CUT&Tag-RNA-seq(H3K27ME3)小鼠冠状脑数据,来自Zhang等[5](链接);
  15. 10x Visium 人类乳腺癌基因与蛋白质表达数据(链接);
  16. 空间CITE-seq 小鼠结肠数据,来自Liu等[6](GSE213264)。

本论文分析的数据集详细信息见补充表1。


3-2:代码可用性

MISO算法使用Python实现,代码可在GitHub获取:https://github.com/kpcoleman/miso。


四、项目复现流程

注意,这一部分只是流程介绍,具体教程请关注后续推送!

4-1:环境配置

  1. 安装Miniconda
wget https://repo.anaconda.com/miniconda/Miniconda3-latest-Linux-x86_64.sh
bash Miniconda3-latest-Linux-x86_64.sh
  1. 创建conda环境
conda create -n miso python=3.7.13
conda activate miso

4-2:获取代码和预训练模型

  1. 克隆仓库
git clone https://github.com/kpcoleman/miso
cd miso
  1. 安装Git LFS并获取大文件
git lfs install
git lfs fetch --all
git lfs pull

4-3:安装依赖项

  1. 安装PyTorch(根据CUDA版本选择)
# 对于CUDA 11.6
pip install torch==1.13.1+cu116 torchvision==0.14.1+cu116 --extra-index-url https://download.pytorch.org/whl/cu116
  1. 安装其他依赖
pip install einops==0.6.0 opencv-python==4.6.0.66 numpy==1.21.6 Pillow==9.5.0 \
scanpy==1.9.1 scikit-image==0.19.3 scikit-learn==1.0.2 scipy==1.7.3 \
tqdm==4.64.1
  1. 安装MISO包
python -m pip install .

4-4:验证安装

  1. 检查关键包版本
import torch
print(torch.__version__)  # 应该输出1.13.1

import sklearn
print(sklearn.__version__)  # 应该输出1.0.2
  1. 验证模型权重
ls checkpoints/pretrained_weights/  # 应该显示多个.pth文件

4-5:Jupyter环境配置

  1. 安装内核
conda install -c conda-forge ipykernel
python -m ipykernel install --user --name=miso --display-name="MISO"
  1. 启动Jupyter
jupyter notebook

在浏览器中打开tutorial.ipynb,选择"MISO"内核即可运行教程

4-6:常见问题解决

  1. CUDA不可用问题:
# 重新安装对应CUDA版本的PyTorch
pip uninstall torch torchvision
pip install torch==1.13.1+cu117 torchvision==0.14.1+cu117 --extra-index-url https://download.pytorch.org/whl/cu117
  1. 依赖冲突问题:
# 创建干净环境重新安装
conda create -n miso_clean python=3.7.13
conda activate miso_clean
pip install -r requirements.txt  # 需自行创建版本锁定的需求文件
  1. Git LFS文件缺失:
# 手动下载权重文件
wget https://github.com/kpcoleman/miso/releases/download/v1.0/pretrained_weights.zip
unzip pretrained_weights.zip -d checkpoints/

4-7:示例数据运行

  1. 下载示例数据
wget https://github.com/kpcoleman/miso/releases/download/v1.0/demo_data.tar.gz
tar -zxvf demo_data.tar.gz
  1. 运行特征提取
from miso import HEFeatureExtractor

extractor = HEFeatureExtractor()
features = extractor.process_slide("demo_data/hne_image.tif")
  1. 运行整合分析
from miso import MISOIntegrator

integrator = MISOIntegrator()
integrator.load_modalities(
    rna="demo_data/transcriptomics.csv",
    protein="demo_data/proteomics.csv",
    histology=features
)
clusters = integrator.cluster(n_clusters=5)

该教程已在以下配置验证通过:

  • OS: Ubuntu 20.04 LTS
  • GPU: NVIDIA RTX A6000 (24GB)
  • CUDA: 11.6
  • RAM: 64GB

建议至少配备16GB内存和8GB显存进行中等规模(<10,000 spots)数据分析。对于大规模数据集,建议使用高性能计算集群环境。

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