反式环辛炔(trans-cyclooctene,TCO)与三聚乙二醇(triethylene glycol,TEG)结合的异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记是一种有效的方法,用于构建具有荧光特性的标记探针,常用于生物成像、细胞标记和靶向递送等应用。
合成步骤
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TCO-TEG的合成:
- 将反式环辛炔与三聚乙二醇通过氨基反应或其他适合的化学反应结合。通常使用TCO的氨基化衍生物(如TCO-amine)与TEG的氨基进行缩合反应,合成TCO-TEG衍生物。
- 反应条件:常温下,在合适的溶剂(如DMF或DMSO)中,反应数小时,反应后通过柱层析纯化产物。
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FITC的标记反应:
- 将合成的TCO-TEG衍生物溶解在适当的缓冲液中(如PBS,pH 7.4),并调节浓度至0.1-1 mg/mL。
- 将FITC异硫氰酸酯溶解在适当的有机溶剂中(如DMSO),然后稀释至所需浓度。
- 将FITC溶液缓慢加入到TCO-TEG溶液中,通常在pH 8-9的条件下反应,反应时间为1-3小时,反应温度可控制在室温。
- 轻轻搅拌以确保均匀混合,避免剧烈搅拌造成的泡沫。
QY小编zyl分享2024.10.9