Pifithrin-α hydrobromide 是一种 p53 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

CAS：63208-82-2

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生物活性：Pifithrin-α hydrobromide 是一种 p53 抑制剂，可阻断其转录活性并防止细胞凋亡。 Pifithrin-α hydrobromide 也是一种 aryl hydrocarbon receptor (AhR) 激动剂。 IC50 和目标：p53[1]
AhR[2] 

体外： Pifithrin-α (PFT-α) hydrobromide 是一种水溶性化合物，可以抑制 p53 蛋白转录。 Pifithrin-α 可以抑制葡萄糖氧化酶 (GOX) 诱导的全细胞裂解物中 p53 蛋白的增加，但环孢菌素 A (CsA) 没有表现出这种抑制作用。值得注意的是，Pifithrin-α 能够阻断 GOX 诱导的 Bcl-2 蛋白减少。同样，Pifithrin-α 而不是 CsA 能够阻止全细胞裂解物中 Bax 的增加[1]。 Pifithrin-α 通过未确定的机制抑制 p53 依赖性细胞凋亡。 Pifithrin-α 还充当芳基烃受体 (AhR) 激动剂和。 Pifithrin-α 是一种有效的 AhR 激动剂，这取决于它结合 AhR、诱导其 DNA 结合复合物形成、激活报告基因活性以及上调经典 AhR 靶基因 CYP1A1 的能力[2].  

体内：当使用 Pifthirin-α (PFT-α) 氢溴酸盐（一种药理学 p53 抑制剂）进行实验时，膜联蛋白 V 阳性 Foxe3-/- SMC 的百分比降至 WT水平。 Pifithrin-α（2.2 mg/kg，腹腔注射）显着降低接受横向主动脉缩窄 (TAC) 的Foxe3-/- 小鼠的主动脉破裂和壁内血肿的发生率（ 50% 至 17%，P<0.05）。在 Pifthirin-α 处理后，升主动脉的平均直径和主动脉中膜中 TUNEL 阳性细胞的百分比也标准化为存活 Foxe3-/- 动物 (P<0.05)[3]。

激酶试验：进行配体结合竞争测定。 Hepa-1 细胞的胞浆细胞提取物是通过将细胞沉淀重悬于含有 0.4 mM 亮肽素的 HEDG 缓冲液 [25 mM Hepes、1 mM EDTA、1 mM 二硫苏糖醇和 10% (v/v) 甘油，pH 7.5] 中而产生的、4 mg/mL 抑肽酶和 0.3 mM 苯甲基磺酰氟，均质化，并在 100,000 g 下离心 45 分钟。在 HEDG 缓冲液中存在 3 nM [3H]TCDD 的情况下，将上清液的等分试样 (120 μg) 与指定浓度的 Pifithrin-α 一起在室温下孵育 2 小时。在冰上与羟基磷灰石一起孵育 30 分钟后，添加含有 0.5% Tween 80 的 HEDG 缓冲液。将样品离心，洗涤两次，重悬于0.2mL闪烁液中，并进行闪烁计数。使用 150 倍摩尔过量的 TCDF 测定非特异性结合，并从总结合中减去以获得特异性结合。报道的特异性结合是相对于单独的[3H]TCDD[2]。

细胞试验：人肝癌细胞系 HepG2 (p53++) 在含 10% 胎牛血清 (FBS) 和 1% 青霉素/链霉素的 RMPI 1640 培养基中于 37°C、含 5% CO2 的气氛中培养。将细胞暴露于 GOX (0-5 0U) 中 0-8 小时，有或没有 Pifithrin-α (20 μM/L)、Pifithrin-μ (5 μM/L)、CsA (10 μM/L)、Sanglifehrin A ( 20 μM/L) 和 NAC (5 mM/L) 分别处理 1 小时。处理后，收集细胞并进行处理以进行进一步的实验[1]。

动物体内实验:小鼠[3] 使用 Foxe3-null (Foxe3-/-) 小鼠。为了研究 p53 在 Foxe3 相关细胞凋亡中的作用，Pifithrin-α 以 2.2 mg/kg 的剂量通过 ip 注射给药，然后在 TAC 前 1 小时溶解在 PBS 中，然后每 48 小时一次。手术后2周对动物实施安乐死，并收获升主动脉组织用于RNA、总蛋白、组织形态计量分析或TUNEL测定。

 参考详情：www.medchemexpress.cn/Pifithrin-_alpha_-hydrobromide.html

参考文献：

[1]. Yu W, et al. Cyclosporine A Suppressed Glucose Oxidase Induced P53 Mitochondrial Translocation and Hepatic Cell Apoptosis through Blocking Mitochondrial Permeability Transition. Int J Biol Sci. 2016 Jan 1;12(2):198-209.

[2]. Hoagland MS, et al. The p53 Inhibitor Pifithrin-α Is a Potent Agonist of the Aryl Hydrocarbon Receptor. J Pharmacol Exp Ther. 2005 Aug;314(2):603-10.

[3]. Kuang SQ, et al. FOXE3 mutations predispose to thoracic aortic aneurysms and dissections. J Clin Invest. 2016 Mar 1;126(3):948-61.