OTSSP167 (OTS167) 是一种高效的 ATP 竞争性 MELK 抑制剂 |MCE

CAS：1431697-89-0

品牌：MedChemExpress (MCE)

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生物活性：OTSSP167 (OTS167) 是一种高效的 ATP 竞争性 MELK 抑制剂，IC50 值为 0.41 nM。 IC50 和目标：IC50：0.41 nM (MELK)  

体外：OTSSP167 抑制 A549（肺癌）、T47D（乳腺癌）、DU4475（乳腺癌）、22Rv1（前列腺癌）和 HT1197（膀胱癌）癌细胞的生长，IC50 值为 6.7、4.3、2.3、6.0和 97 nM，分别[1]。 OTSSP167 可以废除有丝分裂检查点，破坏 MCF7 细胞中的 MCC 和 MCC-APC/C 相互作用。 OTSSP167 导致 GFP-MELK 定位于前中期细胞的细胞皮层[2]。 OTSSP167 是一种 MELK 选择性抑制剂，具有很强的体外活性，IC50 为 0.41 nM[3]。

体内：OTSSP167 (20 mg/kg, iv) 在异种移植小鼠模型中导致 73% 的肿瘤生长抑制 (TGI)； OTSSP167（1、5 和 10 mg/kg，口服）显示 TGI 分别为 51%、91% 和 108%。 OTSSP167（20 mg/kg，口服）对 PC-14 异种移植物没有肿瘤生长抑制作用[1]。

激酶试验：对于体外激酶测定，将 MELK 重组蛋白 (0.4 μg) 与 5 μg 每种底物混合在 20 μL 激酶缓冲液中，其中含有 30 mM Tris-HCl (pH)、10 mM DTT、40 mM NaF、10 mM MgCl2、0.1 mM EGTA 与 50 μM 冷 ATP 和 10 Ci 的 [γ-32P]ATP 在 30°C 下反应 30 分钟。通过添加 SDS 样品缓冲液终止反应并在 SDS-PAGE 之前煮沸 5 分钟。将凝胶干燥并在室温下用增感屏进行放射自显影。将 OTSSP167（最终浓度为 10 nM）溶解在 DMSO 中，并在孵育前添加到激酶缓冲液中。

细胞试验：使用 Cell Counting Kit-8 通过比色测定来测量体外细胞活力。将细胞以 100 μL 的密度接种在 96 孔板中，以产生持续线性生长（A549，1×103 个细胞；T47D，3×103 个细胞；DU4475，4×103 个细胞；22Rv1，6×103 个细胞；和 HT1197） ，2×103 个细胞，每孔 100 μL）。让细胞粘附过夜，然后在 37°C 下暴露于 OTSSP167 72 小时。使用分光光度计在 450 nm 波长下读取板的读数。所有测定均一式三份进行。

动物体内实验:将 MDA-MB-231 细胞注射到 NOD.CB17-Prkdcscid/J 小鼠的乳腺脂肪垫中。将 A549、MIAPaCa-2 和 PC-14 细胞（1×105 个细胞）皮下注射到雌性 BALB/cSLC-nu/nu 小鼠的左胁腹。将 DU145 细胞皮下注射到雄性 BALB/cSLC-nu/nu 小鼠的左胁腹。当 MDA-MB-231、A549、DU145、MIAPaCa-2 和 PC-14 异种移植物的平均体积分别达到 100、210、110、250 和 250 mm3 时，将动物随机分为 6 只小鼠组（除对于 PC-14，使用 3 只小鼠为一组）。对于口服给药，OTSSP167 和其他化合物制备在 0.5% 甲基纤维素载体中，并按指定剂量和时间表通过口腔垃圾给药。对于静脉内给药，将化合物配制在5%葡萄糖中并注射到尾静脉中。两种给药途径均使用每公斤体重 10 mL 的给药体积。每隔一天使用卡尺测定肿瘤体积。

 参考详情：www.medchemexpress.com/OTSSP167.html

参考文献：

[1]. Ji W, et al. OTSSP167 Abrogates Mitotic Checkpoint through Inhibiting Multiple Mitotic Kinases. PLoS One. 2016 Apr 15;11(4):e0153518.

[2]. Chung S, Suzuki H, Miyamoto T, et al. Development of an orally-administrative MELK-targeting inhibitor that suppresses the growth of various types of human cancer. Oncotarget. 2012 Dec 21.

[3]. Cho YS, et al. The crystal structure of MPK38 in complex with OTSSP167, an orally administrative MELK selective inhibitor. Biochem Biophys Res Commun. 2014 Apr 25;447(1):7-11.

[4]. Li S, et al. Maternal embryonic leucine zipper kinase serves as a poor prognosis marker and therapeutic target in gastric cancer. Oncotarget. 2016 Feb 2;7(5):6266-80.