kasp技术原理_KASP基因分型技术服务

KASP基因分型介绍

KASP(Kompetitive Allele-Specific PCR)，即竞争性等位基因特异性PCR，原理上与TaqMan检测法类似，都是基于终端荧光信号的读取判断，每孔反应都是采用双色荧光检测一个SNP位点的两种基因型，不同的SNP对应着不同的荧光信号。

KASP技术与TaqMan法类似，它与TaqMan技术不同的是，它不需要每个SNP位点都合成特异的荧光引物，它基于独特的ARM PCR原理，所有的位点检测终都可以使用通用荧光引物进行扩增，这降低了KASP技术的试剂成本，既有准确度，又降低了成本，更具SNP位点适用性，因此在医学、农学检测方面KASP技术都有很好的应用潜力，如癌症、代谢疾病、心血管疾病、糖尿病、动植物育种、水产养殖等研究。

技术原理

KASP反应包括Primer Mix和Master Mix两种主要成分。Primer Mix由两条末端碱基不同的等位基因正向引物与一条反向引物构成，两条正向引物5’端分别连有不同序列的检测引物序列。Master Mix包含两条带有不同荧光的检测引物。

1、变性模板与Primer Mix中相匹配的引物结合并退火，延伸后序列被加上了检测引物的序列。

2、等位基因特异性的末端序列的互补链合成。

3、带有不同荧光的两条检测引物与互补链结合，特异序列对应的检测引物随PCR反应指数性扩增，相应荧光信号被检测。

4、数据分析。

实验过程：

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