说起SNP Genotyping,大家熟悉的产品很多。例如*经典的Taqman荧光探针法,至今也是Genotyping的金标准。还有Sequenome Massarray飞行时间质谱法,在医学方向应用很多,也有很多商品化检测试剂盒,不过Sequenome需要引物组合做多重PCR,摸索优化难度比较大,耗材成本也不低。前几年大家经常提起的,高分辨熔融曲线HRM也算一个吧,HRM以高灵敏,低成本,灵活的优势深受不少科研工作者的喜爱,只是这项技术对于引物设计和实验操作,仪器的灵敏度和重复性要求都比较高,HRM都是针对一段DNA片段而不是一个位点进行熔融温度差异分析,片段的长短,碱基差异,碱基构成都是影响因素,重复性并不好,HRM更适合于寻找突变体,而非SNP检测,所以大部分客户体验并不好。
那么今天要分享的基因有限公司代理产品,英国LGC公司的KASP技术,原理上类似Taqman检测,也是基于终端荧光读取判断,每孔采用双色荧光检测一个样本的一个位点可能的两种基因型,不同的SNP模板对应不同的荧光产物。所以这项技术的准确度与金标准Taqman一致,而KASP技术与Taqman技术不同的是,它不需要每个SNP位点都去合成特异的荧光引物,它基于自己独特的ARM PCR原理,让所有的位点检测*终都使用通用荧光引物扩增,这大大降低了LGC KASP的试剂成本,既有金标准的准确,又降低了使用成本,比Taqman还具有更好的位点适应性,所以在医学、农学检测方面LGC KASP都有非常好的应用,并在一系列高水平的文章中都有体现,后续我们会继续介绍。
从具体技术上比较