一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备方法

一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备方法

(1)纳米乳的制备：先将占磷酸盐缓冲液4wt％的磷脂和占磷酸盐缓冲液0.5wt％的普朗尼克F-68溶解在1ml磷酸盐缓冲液(PBS)中，然后将占磷酸盐缓冲液10wt％-20wt％的全氟溴辛烷(PFOB)加入到上述缓冲液中，并在超声仪中处理5-10分钟，再用试管振荡器振荡10-15分钟，得粗乳液；之后将制备的粗乳液用去离子水稀释20倍，再通过微孔滤膜挤制2次，得到纳米乳记为NPs；

(2)RGD-纳米乳的制备：将胆固醇-PEG2000-RGD加入到步骤(1)制备的纳米乳液中，然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时得到靶向纳米乳NPs-RGD；

(3)荧光标记的RGD纳米乳的制备：向步骤(2)制备的靶向纳米乳中加入浓度为5mg/mL的荧光染料DiI，然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时，得到DiI标记的RGD-纳米乳。

优选的，所述胆固醇-PEG2000-RGD的制备方法为：将胆固醇-PEG2000-Mal与RGDyc按摩尔比10:1-1:1加入1ml PBS中，室温下置于摇床上以300rpm的速度振荡20-24小时，然后用透析袋在超纯水中透析去除未反应的RGDyc分子，经冷冻干燥机冻干得到靶向分子胆固醇-PEG2000-RGD。

优选的，所述磷脂为大豆卵磷脂(Lipoid S75)。

优选的，所述磷酸盐缓冲液的浓度为5mM，pH为7.4。

优选的，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm。

优选的，所述胆固醇-PEG2000-RGD的加入量与磷脂的摩尔比为1：20。

优选的，步骤(1)中磷脂与F-68的质量比为8：1。

优选的，所述磷脂与全氟溴辛烷(PFOB)的质量比为1:2.5-1:5。

另外，本文还要求保护由所述方法制备得到的RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂以及该显影剂应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。

与现有技术相比，本文具有以下的明显有益效果：

(1)本文使用S75磷脂做膜材料，用胆固醇-PEG2000-RGD分子进行修饰，采用超声和振荡的方法制备纳米乳，其中F-68的添加可以使微乳结构更加稳定，材料便宜易得，制备方法简单并具有良好的生物相容性；

(2)本文制备的纳米乳同时作为129Xe MRI和19F MRI显影剂以及光学成像显影剂，是一种129Xe/19F双通道、双模态MRI显影剂；

(3)作为129Xe Hyper CEST显影剂，本文纳米乳具有超高的灵敏度高，可在皮摩尔浓度下对肺癌细胞进行MRI成像。通过129Xe MRI和19F MRI以及光学成像证明了该纳米乳对肺癌肿瘤具有较好的靶向性，该显影剂可以应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。

 

具体实施方式

下面以具体实施例子，进一步阐述本文。下述实施例仅用于说明本文而不用于限制本文的范围。

实施例1

一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)纳米乳的制备：先将40mg的磷脂Lipoid S75和5mg普朗尼克F-68溶解在1mL浓度为5mM、pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中，