运行nanopolish时出现如下错误:
The fast5 file is compressed with VBZ but the required plugin is not loaded. Please read the instructions here: https://github.com/nanoporetech/vbz_compression/issues/5
阅读上述错误提示中提供的链接https://github.com/nanoporetech/vbz_compression/issues/5可以看到,这个错误经常出现。究其原因是nanopore测序仪产生的fast5文件经过了vbz压缩,但我们的服务器缺少处理该压缩的插件。
参考开发者在上述链接中提供的方案,解决如下(以linux x86_64系统为例):
首先下载与系统对应的plugin安装包(此次下载的是v1.0.1,2022年最新版为v1.0.2):
wget "https://github.com/nanoporetech/vbz_compression/releases/download/v1.0.1/ont-vbz-hdf-plugin-1.0.1-Linux-x86_64.tar.gz"
mkdir ont_vbz_plugin_v1.0.1
tar -xzvf ont-vbz-hdf-plugin-1.0.1-Linux-x86_64.tar.gz -C ont_vbz_plugin_v1.0.1
将libvbz_hdf_plugin.so文件置于$HOME/.local/hdf5/lib/plugin并配置环境变量:
find ont_vbz_plugin_v1.0.1 -name '*.so' -exec mv -t $HOME/.local/hdf5/lib/plugin {} +
export HDF5_PLUGIN_PATH=$HOME/.local/hdf5/lib/plugin
如若经常使用,可在~/.bashrc文件中添加:
export HDF5_PLUGIN_PATH=$HOME/.local/hdf5/lib/plugin
至此,插件安装完毕,可以正常使用nanopolish软件了。
ps
有一款名为f5c的软件(f5c - An optimised re-implementation of the call-methylation and eventalign modules in Nanopolish)通过GPU加速方式实现nanopolish的 call-methylation和eventalign模块的功能。运行其scripts文件夹下的install-vbz.sh脚本可直接实现上述安装过程,但仅限于linux x86_64和aarch64架构。