在质粒合成过程中，怎么查找目的蛋白的CDS序列

在蛋白表达纯化实验中，我们首先要找到自己实验所需的目的蛋白的质粒，一般有几种获取方式：

1.addgene官网上查询是否有开源共享的质粒

2.已经发表文章所用到的质粒，我们可以邮箱联系作者，看作者是否愿意共享

3.自己设计质粒，自己构建，或者找公司合成质粒，但在质粒设计中，往往先需要找到目的蛋白的CDS序列，下面将分享如何获取目的基因的CDS序列

方法：NCBI中寻找目的基因的CDS序列

在NCBI中选择Gene，输入P53

在人中为TP53

在右侧选择RefSeq数据库

点击NM_000546.6检索号

然后下拉找到CDS序列

点击最下方的FASTA文件

把序列粘贴至Snapgene中，新建一个序列

得到新建的序列

得到新建序列后，我们就可以根据序列设计相应的引物，再插入相应的质粒中即可。
 

文章转载自公众号：皮蛋笔记，欢迎关注，随时获取第一手文章内容。