CRISPR验证分析

简介

近年来，CRISPR-Cas9系统被不断改进，已逐渐成为适用于各类生物基因编辑的强大工具。无论是在DNA水平上进行单碱基编辑、小片段缺失、突变，还是在RNA水平上转录调控RNA、实现RNA干扰，或是基于表观遗传学调控DNA甲基化等各方面的研究，都给科研工作者带来极大的便利。CRISPR-Cas9 sgRNA文库结合高通量筛选技术具有广泛的应用，既可以在全基因组范围筛选发现新靶点，还可以快速准确地找到与某种表型相关的基因或基因群。如CRISPR/Cas9 ⾼通量筛选技术在肿瘤细胞进⾏阳性或阴性筛选，可以对靶向候选基因向导 RNA 进⾏富集分析，从中可挖掘肿瘤耐药基因或寻找肿瘤治疗的新靶点。此外sgRNA文库在药物现、基因功能研究、分子诊断、疾病治疗等领域均发挥了重要作用。

应用领域

对于疗效显著但机制不明的药物，可通过药物靶点确定与验证，进行作用靶点的筛选。
上下游调控机制分析，挖掘肿瘤治疗的潜在靶标，为药物研发提供帮助。
鉴于抗肿瘤药物的耐药性，探寻相关耐药基因。
寻找合成致死基因，以提供联合用药治疗方案。
代谢通路调节机制分析，探究代谢疾病治疗机制。

sgRNA文库构建流程