单细胞专题（1） | 单细胞转录组研究样本准备指南（下）

       上篇文章我们全面的了解了组织、血液、细胞以及特殊类型等样本做单细胞转录组测序的制备指南，本文我们继续来学习下分选细胞样本制备方法，有需要的老师们一定要收藏哦！

01  流式分选

       流式细胞分选利用荧光素标记不同的分子，通过调节合适的电压、补偿等，将目的细胞与非目的细胞区分开来。在单细胞测序领域，流式分选可以区分特定细胞群体，并能够对单细胞悬液进行质量优化，让研究目的性更强、准确性更高。

实验建议

       1.分选前建议先做预实验，了解目标细胞的含量占比，以此优化流式细胞仪的分选条件；

       2.分选时间：根据所分选细胞的耐受情况而定，保证细胞活率，建议在一小时之内完成；

       3.细胞收集液：1×DPBS (或培养基) + 0.04％BSA / 5%FBS。

       4.对于流式分选的细胞，需遵循非必要不冻存的原则。

优劣势

       1.流式分选时间较长，对细胞刺激大；

       2.流式分选可进行多参数、不同荧光强度的分选，且可进行多路分选，方式灵活，纯度高（>90%）；

       3.流式分选对设备要求较高，需要分选型流式细胞仪。

02  免疫磁珠分选

       免疫磁珠细胞分选是在磁珠上连接能够与细胞表面抗原结合的特异性抗体，通过外加磁场ÿ