国际人类基因组单体型图计划

国际人类基因组单体型图计划介绍

国际人类基因组单体型图计划的目标是构建人类DNA序列中多态位点的常见模式，即单体型图，简称HapMap。HapMap将成为研究人员确定对人类健康和疾病以及对药物和环境的反应有影响的相关基因的关键信息。这一项目所产生的一切数据将供免费使用。

HapMap计划将由日本、英国、加拿大、中国、尼日利亚和美国的科学家们合作完成[见参加机构]。项目正式开始于2002年10月27-29日的HapMap计划第一次会议（http://genome.gov/10005336），预计进行3年。

遗传多态性和单体型图的用途

大多数常见的疾病，如糖尿病、癌症、中风、心脏病、抑郁症、哮喘等，受众多基因以及环境因子共同作用。尽管任意两个不相关的人的DNA序列有99.9%是一致的，剩下的那0.1%由于包含了遗传上的差异因素而非常重要。这些差异造成人们罹患疾病的不同风险和对药物的不同反应。发现这些与常见疾病相关的DNA序列上的多态位点，是了解引起人类疾病的复杂原因的最重要途径之一。

在基因组中，不同个体的DNA序列上的单个碱基的差异被称作单核苷酸多态性（SNPs）。例如，某些人的染色体上某个位置的碱基是A，而另一些人的染色体的相同位置上的碱基则是G。同一位置上的每个碱基类型叫做一个等位位点。

除性染色体外，每个人体内的染色体都有两份。一个人所拥有的一对等位位点的类型被称作基因型（genotype）。对上述SNP位点而言，一个人的基因型有三种可能性，分别是AA，AG或GG （请参考http://www.dnaftb.org/dnaftb/ 了解基本的遗传学知识）。基因型这一名称即可以指个体的某个SNP的等位位点，也可以指基因组中很多SNPs的等位位点。检定一个人的基因型，被称作基因分型（genotyping）。

人类的所有群体中大约存在一千万个SNP位点，其中稀有的SNP位点的频率至少有1%。相邻SNPs的等位位点倾向于以一个整体遗传给后代。位于染色体上某一区域的一组相关联的SNP等位位点被称作单体型（haplotype）。大多数染色体区域只有少数几个常见的单体型（每个具有至少5%的频率），它们代表了一个群体中人与人之间的大部分多态性。一个染色体区域可以有很多SNP位点，但是只用少数几个标签SNPs，就能够提供该区域内大多数的遗传多态模式。

单体型图将描述人类常见的遗传多态模式。它包括染色体上具有成组紧密关联SNPs的区域，这些区域中的单体型，以及这些单体型的标签SNPs。同时，单体型图还将标示出那些SNP位点关联不紧密的区域。

研究者一般通过比较患者和非患者来发现影响某种疾病例如糖尿病的基因。在两组单体型频率不同的染色体区域，就有可能包含疾病相关基因。理论上，研究者通过对全部一千万个SNP位点都进行基因分型，也能够寻找到这样的区域。但是，目前用这种方法进行检定的成本是过于昂贵。通过单体型图计划将鉴定出20~100万个标签SNP位点，从而提供与一千万个SNP位点大致相同的图谱信息。这样将大幅度地减少成本使研究易于进行。

人群和样品

大多数常见的单体型存在于所有的人类群体中，但它们在不同人群中频率不同。因此，为了选择标签SNPs，有必要获得几个人群的数据。先期的研究发现，单体型频率在尼日利亚（Yoruba）、日本、中国和美国（1980年由Centre d'Etude du Polymorphisme Humain [CEPH] 采集并曾用于其它人类遗传图谱研究的北欧和西欧后裔的样品）人群样本中有着显著的差异。这些差异性保证了通过对这些人群进行大规模的单体型分析的合理性，因而自上述人群的绘制的单体型图应当对世界上所有的人群有益。然而，增加其他人群会获得多少更多信息将通过一项检查其他样品的若干染色体区域的单体型的平行研究做出确切回答。

用于构建单体型图计划的DNA样品共有270份，分别来自90个尼日利亚Ibadan的Yoruba人（30个父母加一个后代组成的三体家系），45个东京的日本人（无关个体），45个北京的汉族（无关个体），和90份CEPH样品（30个三体家系）。样品的数目能使通过单体型图计划发现几乎全部频率大于5%的单体型。在经过恰当的社群参与（community engagement）或公众咨询以及个人的知情同意后，本项目所有新样品的采集程序都获得了相应的伦理委员会的批准。设计社群参与的目的则是为了对具有不同文化背景的取样社群产生的对知情同意和样本采集程序的特殊疑问有所理解和反馈。

CEPH样品是从非盈利的Coriell医学研究所获得（http://locus.umdnj.edu/nigms/）。2004年，经相应的伦理委员会批准后，Coriell将为进一步的研究提供其他血样的DNA或细胞系。样品中只有人群和性别的标识而没有医学或个体的可辨别信息。每一个采集新样品的社群将成立一个咨询委员会，以保持同Coriell的联络并确保这些样品将来的使用与知情同意书上的条款是一致的。

伦理学问题：

这一项目包含若干伦理学问题。因为所研究的样本并不包含捐献者的个人标识，所以泄漏个人信息的风险很小。不过，为了以后研究者能够针对所研究人群选择最佳的标签SNPs，每一个样本将按人群标记。标签SNPs的选择将以单体型频率为基础。如果基因组中某些特定区域的单体型在不同的人群中有显著不同的频率，那么这些区域的标签SNPs也可能因人群而异。所以，每个人群的SNP和单体型频率将被计算和用于比较研究。

在这种情况下，如果在一个人群中发现了一个高频的疾病相关的变异位点，而且与此位点相关的疾病风险在该人群中高于所有或大多数其他人群，就有可能产生对这个群体的诬蔑和歧视。本研究另一个潜在的顾虑是人群的含义来自祖先的居住地域，这可能导致“种族”的划分，而这种更多具有社会含义的划分常被错误地以为是有准确的生物学含义的。项目将通过社群参与来了解目标人群对这些问题的看法或疑问。

科学策略

为了构建单体型图，要对样本的至少100万SNPs进行全基因组规模的基因分型检测。在本研究计划起步时，dbSNP公共数据库中共有280万个SNPs。然而，很多染色体区域的SNPs太少，另有很多SNPs则因为频率太低而无法使用。所以，构建单体型图还需要数百万更多的SNP位点。截止到2003年9月，本项目又发现的280万SNPs。现在这项工作仍在继续进行。

整个SNP分型工作将由加拿大、中国、日本、英国和美国的10个研究中心进行。每个中心将针对所承担的染色体对所有的研究样本进行基因分型检定。这些中心共采用了5种检定分型技术。项目的初期目标（至2004年6月左右）是构建出一个约由60万个在人类基因组中均匀分布的SNPs构成的图谱，其SNP密度约为每5000个碱基一个位点。然后将针对需要定义单体型边界的区域进行更多的SNP位点的检定。分型结果的质量将通过重复样本、所有中心对一组同样SNPs进行检测、以及对一定数量的已检定结果进行不同中心的互相检测来保证。

数据分析

此项研究的基本数据是各人群共计270个样品的SNP等位位点的频率和基因型。为了构建单体型和选择标签SNP位点，本研究将采用标准的SNP连锁分析如D'和r² ，同时发展新的分析方法。因为本研究的所有数据将免费共享，其他研究者也可以用另外的手段来分析数据或是改进分析方法。

本研究产生的数据将显示常见的人类基因组遗传的多态模式，包括个体间遗传多态位点的数量，人群间具有不同单体型频率的区域和不同染色体区域SNPs的连锁范围。

获得数据和知识产权政策

HapMap项目将向公众公布所有的实验数据，以让任何研究者利用这些信息。新的SNP位点、SNP基因分型实验设计、SNP检定结果和频率，以及构建的单体型一经产生，将很快发布。当对染色体区域进行了足够的SNP分型来确定紧密连锁的区域时，这些区域的单体型、个体的基因型和标签SNPs将无条件地公开发布。然而，对那些还没有足够分型密度数据的区域，要获得个体的基因分型结果，就要遵守数据访问政策。这项政策只有很小的约束，既使用者必须同意不能使其他人访问这些数据有所减少，同时只能与也同意这个政策的人士共享这些数据。这个暂时性的政策的唯一目的就是为了保证项目的所有数据能被公众所享有。项目完成时，任何还未发布的数据都将公开。

本研究项目不包含将遗传多态性落实到表现型的有特殊利用价值的研究，如疾病易感或对药物的反应。项目的参加者认为将还未有产生特殊用途的SNP位点、基因型或单体型用于专利发明是不适当的。只要使用者不影响其他人获得本研究的数据，数据访问政策不阻止使用者对他们已经显示有特殊利用价值的SNP位点或单体型图申请专利。在数据公布以前，项目参加者不会将本项目的数据用于自己实验室的其它研究。

内部数据访问政策

在数据发布至dbSNP数据库（如SNP位点、SNP检测设计、等位位点及其频率）或数据协调中心的基因型数据库（如个体的基因型和单体型）之前，国际“人类基因组单体型图计划”的参加者不能将本项目的数据用于自己实验室的其它研究项目（包括他们自己产生的数据）。

国际“人类基因组单体型图计划”的参加者使用与其他使用者一样的数据访问政策。对于基因型和单体型数据来讲，也使用公众数据访问政策的协议。所有参加者已经确认他们接受与其他使用者一样的许可协议。

如果没有确认的用途／功能（即与表现型相关），项目参加者不能对本研究产生的SNP位点或单体型申请专利。参加者如果有功能证据或其他已确认的用途，可以对与疾病或功能相关的SNP位点或单体型申请专利。但是，因为HapMap计划不含有产生功能或应用信息的研究，所以这些结果只能通过HapMap项目以外的研究获得。如果项目参加者想使用本计划的数据进行其它研究，只能通过已对外公布的dbSNP库或数据协调中心的数据库获得信息。如果参加者申请了专利并获得批准，他们不能就此妨碍其他人访问HapMap的数据。