INCB3344 是一种有效的、选择性的和口服生物可利用的 CCR2 拮抗剂 ｜MedChemExpress (MCE)

CAS：1262238-11-8

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：INCB3344 是一种有效的、选择性的和口服生物可利用的 CCR2 拮抗剂，在结合中的 IC50 值为 5.1 nM (hCCR2) 和 9.5 nM (mCCR2)拮抗作用以及 3.8 nM (hCCR2) 和 7.8 nM (mCCR2) 对趋化活性的拮抗作用。 IC50 和目标：IC50：5.1 nM (hCCR2)，9.5 nM (mCCR2)[1]  

体外：INCB3344 也是一种有效的大鼠和食蟹猴 CCR2 拮抗剂，结合拮抗作用的 IC50 值分别为 7.3 和 16 nM，趋化活性拮抗作用的 IC50 值分别为 2.7 和 6.2 nM。 INCB3344 是一种选择性 hCCR2 拮抗剂，对一组 >50 种离子通道、转运蛋白、趋化因子受体和其他选定的 GPCR 表现出超过 1 μM 的 IC50 值。它也是一种选择性 mCCR2 拮抗剂，对小鼠 CCR1 和小鼠 CCR5 的 IC50 值分别 >1 μM 和 >3 μM，这两种趋化因子受体与 mCCR2[1] 。 INCB3344 的药理活性表征首先通过使用小鼠单核细胞系 WEHI-274.1 和125I-标记的 mCCL2 在全细胞结合试验中测试其抑制 CCL2 与 CCR2 结合的能力来评估示踪剂。在此测定中，INCB3344 的结合 IC50 确定为 10±5 nM，并且在 90 nM[2] 的浓度下观察到 >90% 的结合抑制.

体内：当对 CD-1 小鼠进行静脉内给药时，INCB3344 表现出高清除率和中等分布容积，导致 1 小时的短半衰期。然而，尽管其清除率高，但仍可实现良好的口服暴露，剂量为 10 mg/kg 时的 AUC 为 2664 nM·h。口服生物利用度为47%。相比之下，当以相同剂量口服给予 Balb/c 小鼠时，获得略微更好的口服暴露 (AUC = 3888 nM h)。这种 PK 特性，加上其有效的抗 mCCR2 活性和良好的选择性，使该化合物适合用于啮齿动物模型研究[1]。 INCB3344 可防止醋酸脱氧皮质酮/盐诱导的 CCR2 血管表达变化。在单独的一系列实验中，与假动物相比，在醋酸脱氧皮质酮/盐处理期的第 7 天至第 21 天接受 INCB3344 的小鼠的主动脉中 CCR2 表达升高（约高 1.5 倍）；然而，这种 CCR2 表达水平显着低于载体治疗组中观察到的水平（P<0.05，n=6）。同样，在接受 INCB3344 的小鼠中，醋酸脱氧皮质酮/盐处理的小鼠中其受体配体 CCL2 的表达增加会减弱（P<0.05，n=6）。相比之下，在接受载体或 INCB3344[3] 的醋酸脱氧皮质酮/盐处理的小鼠中，CCL7、CCL8 和 CCL12 的水平升高至相似程度。

细胞试验：将 RPMI 1640 (VWR) 中的 WEHI-274.1 细胞 (5×105) 与 RPMI 1640 中含有或不含不同浓度的 INCB3344 一起加载到 96 孔改良 Boyden 室中 8 μm 聚碳酸酯过滤器顶部的孔中。在过滤器下方，将含有或不含 INCB3344 或介质的 30 nM mCCL2 置于相应的 96 孔板中。密封室在 37°C、5% CO2 下孵育 45 分钟。洗涤过滤器，用瑞氏吉姆萨染色，并通过显微镜计数底部室中向 mCCL2 迁移的细胞数量。 INCB3344 拮抗 CCR2 介导的趋化作用的能力被报道为特异性迁移至 mCCL2 的 IC50 值所需的抑制剂浓度。特定迁移定义为总迁移减去背景迁移。通过使用小鼠 MIP-1α 作为配体，使用类似的测定法来确定 INCB3344 对 CCR1 介导的 WEHI-274.1 细胞趋化性的影响。此外，在 INCB3344 存在的情况下，对 C5a、FMLP 和 RANTES 进行了类似的测试，以了解 WEHI-274.1 细胞的迁移情况。在研究INCB3344对CCR5介导的趋化作用的影响时，以小鼠T细胞为细胞系统，以小鼠MIP-1β为配体[2]。

动物体内实验:小鼠[3] 在一组实验中，醋酸脱氧皮质酮/盐治疗的小鼠被进一步随机分配接受 CCR2 拮抗剂 INCB3344（每天 30 毫克/千克；浩源 Chemexpress Co Ltd）或载体（10% DMSO/0.9%诱导高血压后 10 天开始，每天腹腔注射羧甲基纤维素），一直持续到 21 天治疗期结束。这些实验的正常血压对照组由假治疗小鼠组成，在第 10 天至第 21 天接受媒介物。 大鼠[4] 使用成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠（200-250 g）。在 L5 和 L6 椎骨之间鞘内施用 1 μg CCL2 和/或 1 mM INCB3344。给药后30、60、90、120和240分钟对动物进行一次测试。计算每个时间点的最大潜在效应 (MPE) 百分比。

　参考详情：www.medchemexpress.cn/INCB3344.html

参考文献：

[1]. Chan CT, et al. Reversal of vascular macrophage accumulation and hypertension by a CCR2 antagonist in deoxycorticosterone/salt-treated mice. Hypertension. 2012 Nov;60(5):1207-12.

[2]. Dansereau MA, et al. Spinal CCL2 pronociceptive action is no longer effective in CCR2 receptor antagonist-treated rats. J Neurochem. 2008 Jul;106(2):757-69.

[3]. Brodmerkel CM, et al. Discovery and pharmacological characterization of a novel rodent-active CCR2 antagonist, INCB3344. J Immunol. 2005 Oct 15;175(8):5370-8.

[4]. Xue CB, et al. Discovery of INCB3344, a potent, selective and orally bioavailable antagonist of human and murine CCR2. Bioorg Med Chem Lett. 2010 Dec 15;20(24):7473-8

[5]. Zhao W, et al. Enrichment of Ly6Chi monocytes by multiple GM-CSF injections with HBV vaccine contributes to viral clearance in a HBV mouse model. Hum Vaccin Immunother. 2017 Dec 2;13(12):2872-2882.

[6]. Cassini MF, et al. Mcp1 Promotes Macrophage-Dependent Cyst Expansion in Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease. J Am Soc Nephrol. 2018 Oct;29(10):2471-2481.

[7]. Aye-Mon A, et al. CCR2 upregulation in DRG neurons plays a crucial role in gastric hyperalgesia associated with diabetic gastropathy. Mol Pain. 2018 Jan-Dec;14:1744806917751322.